色谱柱分类与选择-内部培训资料[宣贯].pptVIP

突破高纯硅胶柱局限性的必要性 硅胶柱pH适用极限 0 10 20 30 40 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 k pH 硅醇基解离,带负电荷 硅醇基未解离 碱性化合物具良好峰形 但保留不足 对碱性化合物的保留增强,但需严格控制流动相pH 值。封端不佳的反相柱会面临峰拖尾的问题。 pH 10 Nortriptyline Amitriptyline Minutes 0 1 2 3 Minutes 0 1 2 3 pH 2 硅醇基完全解离, 硅胶基体逐步溶解！ 碱性化合物呈中性，保留强,峰性佳。 需要全新的柱技术 * 精品PPT | 实用可编辑 宽pH值色谱柱突破硅胶柱应用禁区的有力手段 优点 缺点 无机基质 (C18 –硅胶) 机械强度高 柱效高 保留稳定 有限的pH应用范围 对碱性分析物拖尾 化学不稳定性 有机基质 (高聚物) 很宽的pH应用范围 无离子型作用 化学稳定性好 机械强度不佳 柱效低 保留行为难以预测 宽pH值色谱柱 * 精品PPT | 实用可编辑 宽pH值色谱柱的几种类型 双齿键合，Agilent * 精品PPT | 实用可编辑 四乙氧基硅烷 (TEOS) 硅甲基嵌入型聚乙氧基硅烷 (MPEOS) 甲基三乙氧基硅烷 (MTEOS) Waters 专利技术 荣获2000年全球 RD 100 大奖 杂化颗粒柱(XTerra?)的合成过程示意 * 精品PPT | 实用可编辑 Tetraethoxysilane (TEOS) Bis(triethoxysilyl)ethane (BTEE) + 4 Polyethoxysilane (BPEOS) 在硅胶聚合物 网络中嵌入的 乙烷基桥键 Anal. Chem. 2003, 75, 6781-6788 U.S. Patent No. 6,686,035 B2 第二代杂化颗粒技术 * 精品PPT | 实用可编辑 高pH条件下柱稳定性的强化测试结果柱寿命比超纯硅胶柱提高十倍以上! * 精品PPT | 实用可编辑 pH对填料稳定性的影响 高pH实验 pH 8时,许多C18硅胶基质过早地丧失柱效 由于填料颗粒溶解,色谱柱内产生空隙 随着键合相覆盖率的增加，色谱柱寿命延长 低pH实验 pH 2时,许多C18硅胶基质过早地丧失柱效 由于键合相之水解作用,被测物丧失保留行为 使用三官能团键合相可获得最佳的稳定性 * 精品PPT | 实用可编辑 灵敏度与选择性的改变 色谱柱: XTerra? RP18, 4.6.x 150 mm, 3.5 μm 检 测: 254 nm (相同进样量) 流动相: 50% 乙腈/40% 水/10% 含 100 mM CAPSO, pH 10 流动相: 30% 乙腈/60% 水/10% 含100 mM 磷酸钠, pH 2.0 Minutes pH 10 0.00 0.25 2 4 6 8 10 12 酮康唑 阿司咪唑 0 酮康唑 阿司咪唑 AU pH 2 色谱图重叠 pH 2 与10：阿司咪唑与 酮康唑分析 * 精品PPT | 实用可编辑 简化方法开发过程 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 pH 中间 pH 硅胶柱 低 pH 硅胶柱 高 pH 聚合物基质柱 宽 pH 范围 填料色谱柱 宽pH值色谱柱之宽pH范围(以一当三) * 精品PPT | 实用可编辑 温度 pH 宽pH值色谱柱：高温稳定性 * 精品PPT | 实用可编辑 高温寿命试验 Peak Number USP Tailing Factor 1. 多虑平 1.2 2. 去甲替林 1.1 3. 阿米替林 1.1 4. 三甲丙咪嗪 1.0 AU -0.005 0.10 Minutes 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 8.00 9.00 10.00 AU -0.02 0.48 Minutes 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 8.00 9.00 10.00 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 AU 0.00 0.26 Minutes 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 8.00 9.00 10.00 AU -0.005 0.10 Minutes 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 8.00 9.00 10.00 第二十一天 第二天 XTerra? RP18 普通硅胶C18 Conditions: Column: XTerra? RP18, 5 μm, 4.6 X 150 mm Mobile Phase: 40% pH 7