生物制药与药品检验技术 工业化生产“之旅”第二站—蛋白质的提取 课件：蛋白质类药物的工业化生产2-蛋白质的提取.pptxVIP

;项目二 多肽类药物的原料制备与质量检验;主讲教师：汤晓;学习内容： （1）蛋白质提取的部位 （2）组织和细胞的破碎 （3）蛋白质提取的条件 （4）影响提取的因素 学习重点： 影响提取的因素; 一、蛋白质提取的部位;动物组织和细胞：超声波、电动搅拌器、匀浆器;植物组织和细胞：加砂研磨、高压挤压、纤维素酶（具有一定硬度和弹性的细胞壁） ;提取条件：尽量提取所需蛋白质，防止蛋白酶的水解和其他因素对蛋白质的破坏。; 四、影响提取的因素;（1）溶液pH值;（2）缓冲盐的选择;（3）金属螯合剂的加入;最常用螯合剂：乙二胺四乙酸（EDTA）和乙二醇双（2-氨基乙基）醚-N，N，N’，N’-四乙酸（EGTA）;蛋白质提取时，一定要去除金属离子吗？ 有时候需要稳定蛋白质中的某些金属离子 如：许多蛋白质被钙离子稳定，但EDTA会螯合二价钙离子，因此不能用这种螯合剂 ;（4）去垢剂处理;为什么用去垢剂？ 降低蛋白质疏水作用，使结合于生物膜或颗粒的蛋白质能够被尽量提取出来;（5）还原剂保护;（6）蛋白水解酶的抑制;金属离子激活的水解酶：加EDTA或柠檬酸缓冲液除去某些金属离子，使酶活受到抑制； 不稳定的水解酶：热提取法； 调节pH； 添加蛋白酶抑制剂，抑制酶活;（7）抑菌剂的使用;实验室常规措施：无菌过滤 ;（8）其它一些特殊要求的保护措施;总结：蛋白质的提取