基因克隆毕业论文.docVIP

...........大学 本科生毕业论文（设计） 题 目 芝麻谷氨酸合成酶和 β-1，3葡聚糖酶基因的克隆 学 院 专业班级 学生姓名 指导教师 撰写日期： 2013 年 5 月1日 芝麻谷氨酰胺合成酶和β-1，3，葡聚糖酶基因的克隆 ....... ............... 摘 要: 芝麻（Sesamum indicum L.）属胡麻科胡麻属，是我国重要的油料作物之一。谷氨酰胺合成酶（Glutamate synthase，GS）对于提高氮素利用效率有很大作用，而β-1,3葡聚糖酶（beta 1,3 glucan enzyme, β1,3 GE）与植物的抗病性有关。为了研究芝麻谷氨酰胺合成酶和 β-1,3葡聚糖酶的功能，利用前人建立的芝麻全长cDNA文库，进行上述基因的克隆。芝麻GS基因的cDNA全长为1290bp。β1,3 GE基因的cDNA全长为1028bp。 关键词：芝麻，基因克隆，谷氨酰胺合成酶，β-1．3，葡聚糖酶 Abstract： Sesame (Sesamum indicum L.), which belongs to Sesamum genus in Pedaliaceae family, is one of the important oil crops in China. The glutamine synthetase (GS) is very helpful for improving utility efficiency of nitrogen, and beta 1,3 glucan enzyme (β1,3 GE) is associated with the disease resistance of plant. In order to study the GS and β1,3 GE function , the full-length sesame cDNA library was sued for gene cloning. The full cDNA length of sesame GS and β1,3 GE genes was 1290 bp and of 1028 bp, respectively. Keyword：Sesame, Gene cloning, Glutamine synthetase, Beta 1,3 glucan enzyme 引言 【研究意义】芝麻属胡麻科（Pedaliaceae）胡麻属（Sesaumu Linn），是世界上重要的优质油料作物之一。其种子含油量为50%—60%，蛋白质含量为20%—30%，且富含芝麻酚、维生素E 等天然抗氧化类物质。中国芝麻年种植面积80 万公顷，总产量约75 万吨，居世界首位[1]。但是，由于芝麻生长发育易受气候条件影响，特别是抗病耐渍性较差，涝害等不良气候因素常导致产量和品质大幅度下降。长期以来，由于芝麻基础研究起步较晚，缺乏与芝麻生长发育相关的分子标记开发、遗传图谱构建[2-4]以及QTL 定位等基础性研究成果的支撑，芝麻优质高产、抗病抗逆育种研究进展缓慢。开展芝麻生长发育等相关分子生物学基础研究对于从根本上解决中国芝麻生产中存在的突出问题具有十分重要的意义。 氮素是影响植物生长发育的主要因素。无论是直接来源于硝酸盐、氨离子、微生物固定氮，还是植物代谢过程中释放的氨，都必须经过谷氨酰胺合成酶（GS）催化才能同化为氨基酸。GS和谷氨酸合成酶（Glutamate synthase, GOGAT)构成的GS-GOGAT 循环式高等植物氮素同化的主要途径。大麦、玉米、水稻、拟南芥等植物的GS基因已被克隆，GS功能研究已经成为提高氮素利用效率的研究热点之一。 β-1,3葡聚糖酶(β1,3 GE)在高等植物中广泛存在。70年代以前，对此酶的研究 主要集中于它对植物本身不同发育阶段的作用．如 种子中葡聚糖的降解、细胞延长、花粉 管伸长、四分体小孢子发育、育性及韧皮部肼胝质去除等。以后在病原物侵染的植物中检测到大量β-1,3葡聚糖酶的存在，且发现它在体外可以降解病原真菌细胞壁并释放出寡糖激发子进而诱导植物其它的防御反应。由此对β-1,3葡聚糖酶的研究开