锐博生物高通量测序样品质量及运输要求.pdfVIP

锐博生物高通量测序样品质量及运输要求.pdf

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锐博生物高通量测序样品质量及运输要求   组织样本  1、 准备:新鲜剥离,清洗,分割,存于 TRIzol/ RNAlater 中。  2、 干重:2g/样品。(注:不同类型的样品DNA/RNA 产量差别较大,具体送样量以达到质 检要求为准。)  3、 运输方式:72 小时内干冰运输。  4 、 备份:接收样品前要求客户分装备份,用于样品检测不合格时分析原因。  5、 推荐处理方法:   冰上预冷生理盐水或 PBS (所用溶液及器皿无DNase 及 RNase);   从活体切取所需组织,置于平皿;加入预冷的生理盐水或 PBS 至淹没组织,漂洗去 除血渍污物,重复 3 次以上(该步为冰上操作,操作时间不宜超过 10 min);   用滤纸吸干样品表面液滴,剪成约 0.2‐0.5cm 的小块(组织快越小,保存效果越好);   放入加有 TRIzol 或  RNAlater 的离心管或冻存管中;   液氮速冻后用封口膜封口。    细胞样本  (包括培养微生物样本)  1、 准备:高速离心收集细胞,存于 TRIzol/ RNAlater 中。  2、 贴壁或悬浮细胞:5X106 细胞/样品。(注:不同类型的细胞DNA/RNA 产量差别较大, 具体送样量以达到质检要求为准。)  3、 微生物:建议选取处于对数生长期的菌液,高速离心收集菌体后,弃上清,加入 TRIzol/  RNAlater,液氮速冻后用封口膜封口。  4 、 运输方式:72 小时内干冰运输。  5、 备份:接收样品前要求客户分装备份,用于样品检测不合格时分析原因。  6、 推荐处理方法:   冰上预冷 PBS (无DNase 及 RNase);   贴壁细胞:去掉培养基后,加入适量预冷 PBS 漂洗一次,按每 10cm2 培养面积加 1mL TRIzol 的比例加入 TRIzol ,反复吹打使所有细胞充分消化,转移到离心管或冻 存管中;   悬浮细胞:离心收集细胞,弃培养液,用预冷 PBS 漂洗一次,按每 5X106 细胞加 1mL  TRIzol 的比例加入 TRIzol ,反复吹打使所有细胞充分消化,转移到离心管或冻存管 中;   液氮速冻后用封口膜封口。    其他特殊样品请与销售或技术支持联系。      客户自行提取 DNA/RNA 的样本要求符合锐博提取样本的质检标准;非特殊情况下,客户提 供质检信息的样本,接收后都要再次质检,确认样本质量没有在运输过程受影响。    DNA样品要求 1、 完整度:基因组 DNA 要求凝胶电泳图显示主带明显可辨(哺乳动物基因组 DNA 主 带23Kb );PCR 产物要求条带单一。  2、 纯度:OD 值介于 1.6~2.0;无蛋白质、RNA 或肉眼可见污染。  3、 浓度:30ng/μl。  4 、 备份:接收样品前要求客户分装备份,用于样品检测不合格时分析原因。  5、 运输样品时请附 1 mL 溶解 DNA 所使用的溶剂。    判定结 建库类型  样品类型  检测方法  检测结果  论  基因组 De novo 测 Level A Qubit ,琼脂糖 m≥10μg  c≥30 ng/μL  序或重测序文库;   基因组 DNA  凝 胶 电 泳

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