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锐博生物高通量测序样品质量及运输要求
组织样本
1、 准备:新鲜剥离,清洗,分割,存于 TRIzol/ RNAlater 中。
2、 干重:2g/样品。(注:不同类型的样品DNA/RNA 产量差别较大,具体送样量以达到质
检要求为准。)
3、 运输方式:72 小时内干冰运输。
4 、 备份:接收样品前要求客户分装备份,用于样品检测不合格时分析原因。
5、 推荐处理方法:
冰上预冷生理盐水或 PBS (所用溶液及器皿无DNase 及 RNase);
从活体切取所需组织,置于平皿;加入预冷的生理盐水或 PBS 至淹没组织,漂洗去
除血渍污物,重复 3 次以上(该步为冰上操作,操作时间不宜超过 10 min);
用滤纸吸干样品表面液滴,剪成约 0.2‐0.5cm 的小块(组织快越小,保存效果越好);
放入加有 TRIzol 或 RNAlater 的离心管或冻存管中;
液氮速冻后用封口膜封口。
细胞样本 (包括培养微生物样本)
1、 准备:高速离心收集细胞,存于 TRIzol/ RNAlater 中。
2、 贴壁或悬浮细胞:5X106 细胞/样品。(注:不同类型的细胞DNA/RNA 产量差别较大,
具体送样量以达到质检要求为准。)
3、 微生物:建议选取处于对数生长期的菌液,高速离心收集菌体后,弃上清,加入 TRIzol/
RNAlater,液氮速冻后用封口膜封口。
4 、 运输方式:72 小时内干冰运输。
5、 备份:接收样品前要求客户分装备份,用于样品检测不合格时分析原因。
6、 推荐处理方法:
冰上预冷 PBS (无DNase 及 RNase);
贴壁细胞:去掉培养基后,加入适量预冷 PBS 漂洗一次,按每 10cm2 培养面积加
1mL TRIzol 的比例加入 TRIzol ,反复吹打使所有细胞充分消化,转移到离心管或冻
存管中;
悬浮细胞:离心收集细胞,弃培养液,用预冷 PBS 漂洗一次,按每 5X106 细胞加 1mL
TRIzol 的比例加入 TRIzol ,反复吹打使所有细胞充分消化,转移到离心管或冻存管
中;
液氮速冻后用封口膜封口。
其他特殊样品请与销售或技术支持联系。
客户自行提取 DNA/RNA 的样本要求符合锐博提取样本的质检标准;非特殊情况下,客户提
供质检信息的样本,接收后都要再次质检,确认样本质量没有在运输过程受影响。
DNA样品要求
1、 完整度:基因组 DNA 要求凝胶电泳图显示主带明显可辨(哺乳动物基因组 DNA 主
带23Kb );PCR 产物要求条带单一。
2、 纯度:OD 值介于 1.6~2.0;无蛋白质、RNA 或肉眼可见污染。
3、 浓度:30ng/μl。
4 、 备份:接收样品前要求客户分装备份,用于样品检测不合格时分析原因。
5、 运输样品时请附 1 mL 溶解 DNA 所使用的溶剂。
判定结
建库类型 样品类型 检测方法 检测结果
论
基因组 De novo 测 Level A
Qubit ,琼脂糖 m≥10μg c≥30 ng/μL
序或重测序文库;
基因组 DNA 凝 胶 电 泳
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