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注射用重组人生长激素 ZhusheyongChongzuRenShengzhangjisu RecombinantHuman Growth Hormone for Injection C990H 1528N 262O300S7 22,125 本品系由含有可高效表达人生长激素基因的工程化细胞，经过发酵、分离和高度纯 化后获得的重组人生长激素（ rhGH ）冻干制成。加入适宜稳定剂和保护剂，不含抗生素 和防腐剂。每 1mg 无水重组人生长激素相当于 3.0 单位。 基本要求 生产和检定用设施、 原材料及辅料、 水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。 制造 2.1 工程细胞 重组人生长激素工程化细胞名称、来源及种子批检定应符合批准的要求。 2.2 原液 2.2.1 种子液制备 将检定合格的工作种子批细胞接种于适宜的培养基（可含适量抗生素）中培养。 2.2.2 发酵用培养基 采用适宜的不含抗生素的培养基。 2.2.3 种子液接种及发酵培养 2.2.3.1 在灭菌培养基中接种适量种子液。 2.2.3.2 在适宜的温度下进行发酵，应根据经批准的发酵工艺进行，并确定相应的发 酵条件，如温度、 值pH、溶解氧、补料、发酵时间等。发酵液应定期进行质粒丢失率检 查（通则 3406 ）。 2.2.4 发酵液处理 用适宜的方法收集、处理菌体。 2.2.5 初步纯化 采用经批准的纯化工艺进行初步纯化，使其纯度达到规定的要求。 2.2.6 高度纯化 经初步纯化后，采用经批准的纯化工艺进行高度纯化，过滤后使其达到 3.1 项要求， 即为重组人生长激素原液。如需存放，应规定时间和温度。 2.2.7 原液检定 3.1 项进行 3 半成品 2.3.1 配制与除菌 按经批准的配方配制稀释液。配制后应立即用于稀释。将原液用稀释液稀释至所需 浓度，过滤后即为半成品，保存于适宜的温度。 2.3.2 半成品检定 按 3. 2 项进行。 2.4 成品 2.4.1 分批 应符合“生物制品分批规程”规定。 2.4.2 分装及冻干 应符合“生物制品分装和冻干规程”及通则 0102有关规定。 2.4.3 规格 0.85mg ， 1.0mg ， 1.2mg ， 1.33mg ， 1.6mg ， 2.0mg ， 3.7mg ， 4.0mg 。 2.4.4 包装 应符合“生物制品包装规程”及通则 0102有关规定。 检定 3.1 原液检定 3.1.1 外观 应为无色澄明或微浊液体。 3.1.2 鉴别 3.1.2.1 反相色谱法 取重组人生长激素原液适量，加 0.05mol/L 三羟甲基氨基甲烷缓冲液（用 1mol/L 盐酸溶液调节 pH 值至 7.5 ）制成每 1ml 中含重组人生长激素 2mg 的溶液，作为供试品溶 液；另取重组人生长激素对照品适量，同法制备，作为对照品溶液。照 3.1.3.1项色谱条 件试验，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。 3.1.2.2 肽图 色谱条件 依法检查（通则 0512 ）。取重组人生长激素对照品，加 0.05mol/L 三羟 甲基氨基甲烷缓冲液（用 1mol/L 盐酸溶液调节 pH 值至 7.5 ）溶解并制成每1ml 中含重 组人生长激素 2mg 的溶液。取此液 300 μ l ，胰蛋白酶溶液 [ 取经甲苯磺酰苯丙氨酰氯甲酮 (TPCK) 处理的胰蛋白酶适量，加 0.05mol/L 三羟甲基氨基甲烷缓冲液溶解并制成每 1ml 含 2mg 的溶液 ]20 与μl0.05mol/L 三羟甲基氨基甲烷缓冲液 300 μl混匀，置 37 ℃水浴 4 小 时，立即置 -20 ℃终止反应，作为对照品溶液；取重组人生长激素原液，按对照品溶液的 方法制备，作为供试品溶液；另取不加胰蛋白酶溶液的供试品溶液作为空白溶液。用辛 基硅烷键合硅胶为填充剂（ 5-10.1%μ m);三氟以醋酸溶液为流动相 A，以含 0.1% 三氟醋 酸的 90%乙腈溶液为流动相 B；流速为每分钟 1.0ml ；柱温为35 ℃；检测波长为 214nm 。 按下表进行梯度洗脱。 时间（分钟） A 相（ %） B 相（ %） 0 100 0 20 80 20 45 75 25 70 50 50 75 20 80 测定法 取空白溶液，对照品溶液和供试品溶液各 100 μ l ，分别注入液相色谱仪，记 录色谱图。排除空白溶液色谱峰后，供试品溶液肽图应与对照品溶液一致。 3.1.2.3 高分子蛋白质保留时间 3.1.4项下记录的色谱图中， 供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。 3.1.2.4 等电聚焦 取重组人生长激素原液用水稀释成每 1ml 含重组人生长激素 1mg 的溶液，取此溶液 90 μ l ，加两性电解