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- 2020-12-14 发布于广东
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1、直接计数法:指用计数板在光学显微镜下直接观察细胞并进行计数的方法。 原理:将1cm2×0.1mm的薄层空间划分为400小格,从中选取80或100小格,计数其中的细胞数目,换算成单位体积中的细胞数。 适用范围:个体较大细胞或颗粒,如血球、酵母菌等。不适用于细菌等个体较小的细胞,因为(1)细菌细胞太小,不易沉降;(2)在油镜下看不清网格线,超出油镜工作距离。 特点:快速,准确,对酵母菌可同时测定出芽率,或在菌悬液中加入少量美蓝可以区分死活细胞。 血球计数板法 2.涂片染色法 应用:可同时计数不同微生物的菌数,适 于土壤、牛奶中细菌计数。 方法:用镜台测微尺计算出视野面积;取 0.1ml菌液涂于1cm2面积上,计数后代 入公式: 每ml原菌液含菌数 =视野中平均菌数×涂布面积/视野面积×100 ×稀释倍数 2、间接计数法 (1)平板菌落计数法 (2)膜过滤法 (1)平板菌落计数法 平板菌落计数法:浇注平板或涂布平板 平板菌落计数法 ★技术要求:样品充分混匀,操作熟练快速(15~20min完成操作),严格无菌操作; ★注意事项:每一支吸管只能用于一个稀释度,样品混匀处理,倾注平板时的培养基温度; ★适用范围:中温、好氧和兼性厌氧、能在营养琼脂上生长的微生物, ★误差:多次稀释造成的
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