离体家兔肠肌运动.docxVIP

个人收集整理 仅供参考学习 离体家兔肠肌运动 1.实验目的： 学习哺乳动物离体肠标本制备方法， 观察消化道平滑肌的一般生理特性及某些因素对舒缩活动的影响。 2.实验原理： 消化道平滑肌和骨骼肌、心肌一样 ,也具有兴奋性、传导性和收缩性 ,有些也具有自律性。 相比之下消化道平滑肌的兴奋性低 ,收缩慢 ,伸展性大 ,具有紧张性收缩 ,对化学物质、温度变化等刺激较敏感的特性。本实验选取家兔十二指肠。 十二指肠离体后 ,将其置于 38℃台氏液中 ,观察其收缩活动及环境变化的影响 ,观 察分析上述生理特性。 个人收集整理 勿做商业用途 3.实验材料： 1、实验动物 :家兔。 2、实验器械 : 电热恒温水浴锅、麦氏浴槽、张力换能 器、生物记录系统、注射器、培养皿、烧杯、螺丝夹 3、实验药品 :0.001%乙酰 胆碱、 0.001%肾上腺素、 1N NaOH 溶液、 lN HCl 溶液。 个人收集整理 勿做商业用途 4..实验方法： 4.1、标本制备（肠肌标本） ①击昏家兔 :用木槌猛击兔头枕部 ,使其昏迷。 ②剖开腹腔快速取出肠管 :立即剖开腹腔 ,找出胃幽门与十二指肠交界处 ,快速取 长 20~30cm 的肠管 (十二指肠 ),先将与该肠管相连的肠系膜沿肠缘剪去 ,置于供氧台氏液中轻轻漂洗 ,把肠内容物基本洗净。 个人收集整理 勿做商业用途 4.2、标本固定 制作离体肠标本 :将肠管分成数段 ,每段长 1-2cm,上端用线连接张力换能器 ,下端用线固定于固定钩，保存于供氧的 38℃左右的台氏液中， 调节肌张力至 2~3g。个人收集整理 勿做商业用途 4.3、仪器连接及参数（仪器定标） 张力换能器与生物信号采集处理系统第一通道，生物信号采集处理系统（ RM6240 系统）参数设置：直流，滤波频 率 10Hz，灵敏度 3g，采样频率 200Hz，扫描速度 1s/div 个人收集整理 勿做商业用途 4.4、实验观察 1 待标本稳定后 ,记录十二指肠平滑肌收缩的对照曲线。 2 乙酰胆碱的作用 :用滴管吸入 0.01%乙酰胆碱 (Ach)向灌流浴槽内滴 1~2 滴。观察到明显效应后 ,立即从排水管放出浴槽内含乙酰胆碱的台氏液 ,加入新鲜温台氏 液 ,以洗涤或稀释残留的乙酰胆碱 ,使之达到无效浓度 ,待十二指肠运动恢复后进行下一项。 3 肾上腺素的作用 :按上述方法将 0.01%肾上腺素加入浴槽内 1~2 滴,观察十二指肠运动的反应。 当效果明显后 ,立即更换台氏液。 4NaOH 的作用 :按上述方法将 NaOH 溶液 2~3 滴入灌流浴槽内 ,观察其反应 ,效果明显后迅速冲洗 ,更换台氏液。 5HCl 的作用 :按上述方法将 1~2 滴 1mol/L HCl 溶液入浴槽内 ,观察其反应 ,效果明显后迅速冲洗 ,更换台氏液。 个人收集整理 勿做商业用途 5.实验结果： 1 / 4 个人收集整理 仅供参考学习 出现收缩频率变快 ,幅度增加 0.001%乙酰胆碱 (Ach) 曲线出现收缩频率变慢 ,幅度减小以及基线下移 0.001%肾上腺素 2 / 4 个人收集整理 仅供参考学习 描记曲线出现收缩幅度增加 NAOH 描记曲线出现收缩幅度降低 ,频率变慢。 HCL 6.实验讨论： 6.1、正常情况下 ,我们观察到离体十二指肠平滑肌在台氏液中可以自动地、 3 / 4 个人收集整理 仅供参考学习 缓慢地收缩。 6.2、在浴槽中加入 0.001%乙酰胆碱 (Ach)2 滴后 ,可见离体肠管活动增强 ,描记曲线出现收缩频率变快 ,幅度增加。机制如下 :①Ach 与肌膜 M 受体结合 ,使平滑 肌 Ca2+专用通道开放 ,Ca2+内流上升 ,一方面使肌浆 [Ca2+]上升 ,收缩幅度上升 ;另一方面 ,使平滑肌兴奋性上升 ,直接或间接使其收缩频率上升。 ②Ach 与肌膜 M 受体结合 ,引起生电性钠泵活动 ,使静息点位下降 ,最终引起平滑肌兴奋性上升 ,使其 收缩频率上升。 个人收集整理 勿做商业用途 6.3、在浴槽中加入 0.001%肾上腺素 2 滴(约 0.2ml) 后,可见离体肠管活动减弱 , 描记曲线出现收缩频率变慢 ,幅度减小以及基线下移。机制如下 :①肾上腺素与肠肌细胞膜上的 α 和β两种受体共同结合 ,使 K+ 、Ca2+外流增多 ,细胞膜发生超极 化 ,肠肌兴奋性降低 ,收缩频率下降。②同时 ,肾上腺素还单独作用于 β 受体 ,使Ca2+泵活动上升 ,还可以使 Ca2+外流增加 ,使肌浆 [Ca2+]下降 ,使收缩频率下降。③此外 ,肾上腺素还能使生电钠泵活动上升 ,引起细胞膜发生超极化 ,肠肌兴奋性 降低 ,收缩频率下降。 个人收集整理 勿做商业用途 6.4、在浴槽中加入 1NNaOH 溶液 2 滴后 ,离体肠管活动增强 ,描