实验1酶切和连接.ppt

成都医学院-生化与分子生物实验 实验十 限制性酶切与连接 成都医学院-生化与分子生物实验 载体( Vectors) 种能够结合外源DNA片段形成重组DNA,并能进行自我 复制的DNA分子称为 Vectors.主要载体:质粒、噬菌体、病毒 按功能分类:克隆载体(构建基因组文库或cDNA文库) 测序载体、表达载体以及能在两个不同物种中存在的穿梭质粒 随着生物技术的发展和科学研究的深入,不断出现具有不同功 能的新载体,如可以容纳几百万碱基的酵母人工染色体。 EcoRI Sall Kpnl BamHI Pst 结构的三大要素: Hindlll Xhol Pvull ECoRV Bgll ++++++ 多克隆位点 选择标记(耐药性,Lac乙) 独立的复制单位 Multiple Cloning Site Drug Resistance gene (for example, ampicillin resistance) Origin of DNA Replication SspI MCS M139n M13。vi ndIII 3162bp atep p 3.162kb I Barri pMB Sacl ECORI 由pUC18改造而来,大小为3162bp。相当于在pUC18中增如了帶有M3 噬菌体DNA合成的起始与终止以及包装进入噬菌体顒粒所必需的顺式序列。 (二)材料 模板DNA 引