蛋白质与酶工程知识点---仅供参考.docxVIP

1、易错 PCR: 通过调整反应条件来使 PCR扩增过程中复制 错配率 增加，在目的基因中随机引入突变，继而获得蛋白质分子的随机突变体 提高镁离子浓度或加入锰离子 降低体系中一种的 dNTP浓度（至少 5-10%） 运用低保真度 DNA聚合酶 增加 DNA聚合酶的浓度 属于无性进化：单一基因内进行遗传突变，费力、耗时，多用于小片段（ 800bp 以下） 2、酶的概念： 酶是一类由活细胞产生的， 对其特异底物（ substrate ）具有高效催化作用的生大分子，包括蛋白质和核酸 3、 辅酶 : 与酶蛋白结合疏松，可用透析或超滤的方法除去 + (NAD) 。 辅基 : 与酶蛋白结合紧密，不能用透析或超滤的方法除去 (FAD、 FMN) 酶的活性中心 ：或称活性部位，指必需基团在空间结构上彼此靠近，组成具有特定空间结构的区域，能与底物特异结合并将底物转化为产物。 4、抗体酶或催化抗体 ：是具有催化功能的抗体。本质：免疫球蛋白，即具有催 化作用的免疫球蛋白 5、酶促反应特点 ： ① 酶促反应具有极高的效率 ② 酶促反应具有高度的特异性： 绝对特异性、 相对特异性、 立体结构特异 性 ③ 酶促反应的可调节性：对酶量的调节，对酶活性的调节 6、诱导契合假说： 酶与底物相互接近时，其结构相互诱导、相互变形和相互适应，进而相互结合。这一过程称为酶 - 底物结合的诱导契合假说 。 7、底