水杨酸介导的草莓抗白粉病的分子调控机制.pdfVIP

摘要 摘要 草莓白粉病是草莓栽培中最普遍的重要真菌病害，常会给草莓产业造成重大经济 损失。目前国内外对这种真菌病害的防治主要依赖于化学制剂，这必然给消费者健康 和食品安全带来威胁，因此开展草莓真菌病害的高效无害化防治具有重要的实践意义。 了解草莓抗白粉病的分子调控机制是开展高效无害化防治草莓白粉病的基础，也是草 莓优良品种培育和遗传改良的基础之一。目前大量研究表明植物生长调节物质水杨酸 （SA）和茉莉酸（JA ）等在植物抗病应答中起着重要调控作用。本论文以八倍体草莓 红颜 （Fragria x ananassa cv. ‘Benihoppe’ ）为研究材料，将草莓分为双蒸水处理组 （对 照组）和SA 诱导组，在温室大棚条件下侵染白粉菌（Podosphaera aphanis ），采用比 较转录组研究技术，筛选获得白粉菌侵染前后草莓的差异基因，通过对水杨酸途径、 茉莉酸途径及苯丙烷代谢途径相关差异基因（DEGs ）的表达分析，确定草莓抵御白粉 菌的调控网络节点，以期从植物生长调节物质调控的信号通路角度阐明草莓抗白粉病 的分子调控机制，为提高草莓白粉病的防治效率提供理论基础。主要研究结果如下： 1. 明确了SA 诱导草莓抗白粉病的生理生化特性。白粉菌侵染后，草莓体内与抗 病相关的活性氧代谢系统酶 （如SOD、POD 、CAT、PAL 和PPO ）的活性提升，而外 施SA 后会使草莓体内以上酶类的活性升高幅度高于对照组。同时，与光合作用相关 的叶绿体荧光参数 （F /F 、Φ 和Φ ）在白粉菌侵染后会明显下降，但经SA 诱导 v m NO PSII 的草莓叶片中这些参数的降低幅度小于对照组。此外，SA 诱导组内白粉菌孢子萌发 率明显低于对照组的。结果表明SA 不仅会提高草莓的抗白粉病能力，而且也能降低 白粉菌孢子的萌发率。 2. RNA-seq 结果显示，对照组草莓应答白粉菌侵染的unigenes 是48,020 条，SA 诱导组草莓应答白粉菌侵染的unigenes 是45,896 条。对照组的草莓应答白粉菌侵染 的DEGs 是4,198 个，而SA 诱导组白粉菌侵染前后的DEGs 是3,754 个。此外，PCA 分析也证实了DEGs 是稳定存在的。同时，KEGG 通路富集分析发现，苯丙烷和黄酮 类生物合成途径是草莓应答白粉菌侵染的主要的富集通路。系统进化分析和保守域分 析表明FaMYB9/11 、FabHLH3 和FaTTG1 参与调控叶片中的花青苷生物合成，它们 将导致次生代谢物原花青素的积累。而我们进一步研究也证明SA 诱导组的草莓体内 类黄酮（TFC ）和原花青素（PAs ）含量高于对照组的，结果说明SA 可以提高草莓体 I 水杨酸介导的草莓抗白粉病的分子调控机制 内的TFC 和PAs 含量。 3. 本研究证明草莓中SA 生物合成中两个关键酶是苯丙氨酸解氨酶（PAL ）和异 分支酸合成酶（ICS ），这与其他物种中是一致的。水杨酸合成的两个关键基因（FaICS1 和FaPAL2 ），对照组白粉菌侵染过程中FaICS 1 表达量变化不显著，FaPAL2 表达量 呈现显著上调趋势，而SA 诱导组FaICS1 和FaPAL2 表达量在诱导初期显著上调，表 明红颜草莓对白粉菌的应答可能是以PAL 途径为起点的，而ICS 途径可能在白粉菌 侵染初期受到抑制。白粉菌侵染草莓叶片的早期（侵染三天内），SA 诱导的PR1 基 因表达量显著上调是不依赖FaNPR1 的；而FaNPR3 可能是SA 信号通路的抑制因子， 草莓需要快速平衡SA 过量引起的负面效应。SA 诱导期初与JA 信号途径相关的基因， FaLOX 、FaAOS 、FaJAR 、FaJAZ 、FaWKRY33 和FaMYC2 表达量显著升高，暗示了 SA 途径与JA 途径具有协同作用，SA 可能会在一定程度上促进JA 的生物合成，JA 与SA 在草莓抗白粉病的过程中具有协同作用。另外，两组处理中草莓体内编码病程 相关蛋白PRs （PR1 、PR2 、PR3 和PR5 ）的基因在整个病程期间的表达量均呈现出持 续上调趋势，说明它们在草莓抵抗白粉菌中发挥重要作用。综上所述，SA 诱导可通 过促进JA 的生物