丽春红S染色液.docxVIP

丽春红 S 染色液 丽春红（ Ponceau S）也称猩红，可以用于 PVDF 膜、硝酸纤维素膜 nitrocellulose membrane） 和 醋 酸 纤 维素 膜 （ cellulose acetate membrane）上的蛋白的检测。丽春红带负电荷，可以与带正电荷的 氨基酸残基结合， 同时丽春红也可以与蛋白的非极性区相结合， 从而形成红色的条带。丽春红染色的灵敏度不及 考马斯亮蓝染色 。 丽春红对蛋白的染色是可逆的，染色后可以用蒸馏水， PBS或其它适当溶液洗去。因此，蛋白质 N端测序时将 SDS胶上的蛋白转移 到 PVDF膜，用丽春红染色后将目的条带切下用于测序。注意：丽春红染色液不适用于尼龙膜上的蛋白的检测。使用说明 将 PVDF膜、硝酸纤维素膜或醋酸纤维素膜浸没在丽春红染色液中，摇动 5-10 分钟或更长时间；取出印迹膜，用蒸馏水， PBS或其它适当溶液漂洗 2-3 次，可出现清晰条带，记录结果；用蒸馏水， PBS或其它适当溶液漂洗 2-3 次，每次 3-5 分钟，去除丽春红，进行后续的 WB检测。 补充：丽春红染色液也可以直接用来染 PAGE胶，不过，在染色之前 最好用甲醇 - 乙酸溶液浸泡一下 PAGE胶，起到固定蛋白的作用。 丽春红染色液的 配制： 常用的丽春红染色液有两种： 一种用乙酸配制， 另外一种用三氯乙酸 （TVA）和 5- 磺基水杨酸（ 5-Sulfosalicylic acid ）配制。 配制方法如下： 一、用乙酸配制成分： 0.1%（w/v ）丽春红， 5%（v/v ）乙酸， ddH2O。 4 ℃保存，不要冻上。也可以配成“ 0.2%（w/v ）丽春红， 3%（v/v ）乙酸， ddH2O”。 二、用三氯乙酸和 5- 磺基水杨酸成分： 2% （w/v ）丽春红， 30%的三 氯乙酸， 30%的 5- 磺基水杨酸。