中药化学技术 大黄中游离蒽醌的提取分离与检识、醌类 醌类 -实训大黄中游离蒽醌的提取分离与检识.pptVIP

醌类化合物 实训：大黄中游离蒽醌的提取分离与检识 任务导入 大黄系蓼科多年生草本植物掌叶大黄、唐古特大黄或药用大黄的干燥根及根茎，其主要成分为蒽醌类化合物。 1. 用索氏提取器提取大黄中的总蒽醌类化合物。 2. 配制不同pH的缓冲溶液，用pH梯度萃取法分离大黄提取液中不同酸性的游离蒽醌。 3. 用碱液、醋酸镁、Molish反应分别检识大黄提取物。 4. 用薄层色谱技术检识提取物。 实训操作 实训操作步骤 （一）提取与分离 1. 水解药材 称取大黄粗粉30g，加20%H2SO4水溶液100mL左右，在水浴上100℃加热3～4h，抽滤，滤饼水洗至近中性，抽干，分散，于70℃左右干燥。 2. 提取总游离蒽醌成分 干燥后的药渣，粉碎，装入滤纸筒，密封，放入索氏提取器中，加入乙醚80～100mL，连续回流提取3～4h，得乙醚提取液。乙醚提取液用5%NaOH溶液萃取3～5次（注意萃取振摇一次必须放气），最后一次碱水层为淡红色（乙醚与碱水比例1︰1、1︰0.5、1︰0.5、…。），合并碱水层，用浓HCl调pH2～3，静置，析出蒽醌总苷元结晶，放置1～2h。将蒽醌总苷元结晶抽滤，80℃烘干。称重，计算产率%。（产率%=蒽醌总苷元结晶g/大黄药材g×100%）。 实训操作步骤 3. pH梯度萃取法分离苷元 （1）配制缓冲溶液 配制pH8和pH9.9的缓冲液 （2）大黄酸的分离：蒽醌总苷元加50～100ml乙酸乙酯溶解，置500mL分液漏斗中，加入pH8的缓冲液溶液萃取，萃取液用浓HCl调pH2～3，静置，析出大黄酸结晶，抽滤，5ml蒸馏水洗涤，抽干，即得。 （3）大黄素的分离：分离大黄酸后的乙酸乙酯液，以pH9.9的缓冲液溶液萃取，操作同上。 （4）芦荟大黄素的分离：分离大黄素后的乙酸乙酯液，再以5%NaOH溶液振摇萃取，操作同大黄酸的分离。 （5）大黄素甲醚和大黄酚的分离：分离芦荟大黄素后的乙酸乙酯液，再以5%NaOH溶液振摇萃取至淡红色（乙酸乙酯与碱水比例1︰1、1︰0.5、1︰0.5、…），合并碱水层，同上操作。 实训操作步骤 （二）提取物的鉴别 1.碱液试验 　　　取各大黄提取物结晶少许，置试管中，加1ml乙醇使溶解，加数滴10％氢氧化钠试剂，羟基蒽醌应显红色。 2.醋酸镁试验 　　　取各大黄提取物结晶少许，置试管中，加1ml乙醇使溶解，加数滴0.5％醋酸镁乙醇试剂，羟基蒽醌应显橙、红、紫等颜色。 3.Molish反应 　　　取水解液用20％氢氧化钠中和为pH7，分置于试管中，加10％α-萘酚乙醇溶液1ml，振摇后倾斜试管45°，沿管壁滴加2ml浓硫酸，勿振摇，观察两液面交界处颜色变化。同时可用大黄酚和大黄素甲醚等作对照。 实训操作步骤 （二）提取物的鉴别 4.薄层色谱检识 吸附剂：硅胶CMC-Na板（10×20cm）。100℃活化1h后使用。 试液：分别自制大黄酸、大黄素、芦荟大黄素的乙醇溶液（每1ml含1mg）。 对照品：以上各成分对照品乙醇混合溶液（每1ml各含1mg）。 展开剂：石油醚（30℃～60℃）-乙酸乙酯-甲酸（15∶5∶1）。 显色剂：在可见光下观察，记录黄色斑点出现的位置，然后再用浓氨水熏蒸或喷雾5%醋酸镁甲醇溶液，斑点应显红色。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 实训思考 1. pH梯度萃取法的原理是什么？适用于哪些天然药物中成分的分离？ 2.大黄中羟基蒽醌化合物的极性、酸性与结构的关系如何？排列顺序如何？ 3.大黄酚和大黄素甲醚结构相似，请设计分离方法。 4.萃取过程中若出现乳化现象，应如何处理？ 根据实训指导书自选项目进行第二课堂训练 提交书面文件