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一、什么是植物组织培养?;分株繁殖;扦插繁殖;器官(organ):根、茎、叶、花、果实、种子等
组织(tissue):花药、胚珠、胚、胚乳、形成层、皮层等
细胞(cell):体细胞、生殖细胞、花粉等;无菌
离体材料:
①器官:根、茎、叶、花、果实
②组织:花药组织、胚乳、皮层
③细胞:体细胞(2n)、生殖细胞(n)
④原生质体
培养基 (人工)
培养条件:温度、光照、湿度 ;A Glimpse of
Plant Tissue Culture;芦荟的植物组织培养过程;以植物的体细胞(器官/组织,细胞/原生质体)为培养???料,可以诱导形成完整植物体。;以植物的性细胞为培养材料,可以诱导形成完整的植物体。单套染色体组,不能正常开花结实。;1、广义概念:
无菌操作分离植物体一部分(即外植体)接种到培养基,在人工条件下培养直至生成完整植株。
2、狭义概念: 指对植物体组织或由植物器官培养产生的愈伤组织进行培养直至生成完整植株。;广义和狭义概念有何区别?;1.根据被切除的植物体来源不同和对象不同分为:;2.根据培养方式:固体培养、液体培养 ;(1)固体培养法
是最常用的方法。该方法简单,易行,
但养分分布不均,生长速度不均衡,并常有
褐化中毒现象发生。
(2)液体培养法
由于液体中氧气含量较少,常用振动培养的方法以确 保氧气的供给,往复式摇床或旋转式摇床进行培养,速度一般为50-200r/min,这种定期浸没的方法,既能使培养基均一,又能保证氧气的供给。 ;3.根据培养器官的不同:
;;;初代培养:;;三、植物组织培养的理论基础—细胞全能性;2、植物细胞全能性的表达;(2)细胞的再分化和形态(器官、胚)建成;植物再生植株的途径;胡萝卜离体根;脱分化(dedifferentiation);3、细胞全能性的实现途径;四.愈伤组织的形成和形态发生;Stage 1. Induction(诱导期): ;诱导期细胞内发生的变化;Stage 2. Cell division 分裂期; 细胞分裂快,结构疏松,缺少有组织的结构,维持其不分化的状态,颜色浅而透明。;Stage 3. Differentiation 分化期;A 细胞分裂部位和方向发生改变:
B 形成分生组织瘤状或片状结构和维管束。
C 细胞的体积相对稳定,不再减少。
D 出现了各种类型的细胞:如管胞、纤维细胞、薄壁细胞、分生细胞、色素细胞等。
E 生长旺盛的愈伤组织呈乳白色、白色或浅绿色,老化的多转化为黄色或褐色。;五、愈伤组织的形态发生方式:;(一)器官(不定芽)发生方式(adventitious bud);愈伤组织的器官发生顺序有三种情况:;胚状体(embryoid):指在组织培养中,由一个非合子细胞(体细胞),经胚胎发生和胚胎发育过程(经过原胚、球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚5个时期),形成具有双极性的胚状结构。;注意:体细胞胚;胚状体与合子胚的比较:;胚状体发生途径与器官发生途径形成植株的区别:;;Characteristics of Plant Tissue Culture Techniques;植物组织培养的意义及应用;(二)应用领域;组培试管苗;七、植物组织培养的展望
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