植物组织培养实验(2).pptxVIP

实验二　黄瓜无菌苗愈伤组织的诱导;（二）实验原理 在一定的条件下，不同器官（根、茎、叶等）来源的外植体均可以脱分化形成愈伤组织。;;;（三）实验材料和用具 实验材料：黄瓜无菌苗 实验药品： MS、 1mg/ml NAA 、 1mg/ml 6-BA、1mol/L HCl、1mol/L NaOH、蒸馏水、灯用酒精、70％酒精、无菌水 。 灭菌培养基：MS1（MS+1.0mg/LBA+0.5mg/L NAA）;实验用具： 天平、烧杯、玻璃棒、量筒、移液枪、三角瓶、pH试纸、电炉、高压灭菌锅。 无菌室、无菌滤纸、无菌培养皿、烧杯、解剖刀、镊子、剪刀、酒精灯、酒精棉花、滴管、记号笔、废液罐、火柴、光照培养箱。;（四）实验步骤 配制以下培养基各100ml ： MS2：MS+2.0mg/LBA+0.1mg/L NAA MS3：MS+2.0mg/LBA+0.5mg/L NAA MS4：MS+2.0mg/LBA+2.0mg/L NAA 取200ml烧杯3只，标记，各加入4g MS培养基和100ml蒸馏水，加热直至完全溶解。 各加入 1mg/ml 6-BA 200μl，并不断搅拌。 分别加入 1mg/ml NAA 10、50、200μl，并不断搅拌。 用1mol/L HCl或NaOH调节pH至5.8～6.0。;分装。将3种培养基分别分装到4个三角瓶中，做好标记。 灭菌。用高压蒸汽灭菌锅在121℃