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- 2021-01-03 发布于云南
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第十二单元 生物技术实践 第2讲 微生物的培养与应用 * 1.培养基 (1)概念:人们按照微生物对________的不同需求,配制出供其________的营养基质。 (2)营养组成:一般都含有___________和无机盐。此外,还需要满足微生物生长对________、氧气以及__________的要求。 (3)分类 3.大肠杆菌的纯化培养 (1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 (2)纯化大肠杆菌的方法 ①纯化培养原理:想方设法在培养基上得到______________的肉眼可见的__________, 即可获得较纯的菌种。 ②纯化大肠杆菌的关键步骤:________________。 【考点知识突破答案检索】1.(1)营养物质 生长繁殖 (2)水、碳源、氮源 pH 特殊营养物质 (3)固体 液体 2.(1)外来杂菌 (2)化学药剂消毒 干热灭菌 高压蒸汽灭菌 外来杂菌 3.(1)称量 灭菌 倒平板 * ③常用的微生物接种方法有两种 a.平板划线法:是通过________在琼脂固体培养基表面________的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。 b.______________:是将菌液进行一系列的________,然后将_________的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。 (3)菌种的保存方法 ①对于频繁使用的菌种,可以采用________的方法。 ②对于需要长期保存的菌种,可以采用________的方法。 【教材深挖】 1.平板冷凝后,为什么要将平板倒置? 2.涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求,说一说第2步应如何进行无菌操作? 【考点知识突破答案检索】 (2)由一个细胞繁殖而来 菌落 接种 接种环 连续划线 稀释涂布平板 梯度稀释 不同稀释度 (3)临时保藏 甘油管藏 教材深挖——启动高考长句应答模式 1.平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,平板倒置,既可以防止皿盖上的水珠落入培养基,又可以避免培养基中的水分过快地挥发。 2.应从操作的各个细节保证“无菌”。例如,酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等。 * 答案 (1)碳源和能源 (2)BD (3)灭菌 (4)D 【解析】(1)葡萄糖为主要的能源物质,是一种含碳的有机物,因此该培养基的葡萄糖为微生物的生长繁殖主要提供碳源和能源。(2)该培养基以尿素为唯一氮源,只有尿素分解菌才能在该培养基上生长繁殖,因此属于选择培养基;该培养基配方中加入了凝固剂琼脂,又属于固体培养基,即B、D正确。(3)在培养基上划线操作中,操作的第一步及每次划线之前都要灼烧接种环,其目的是对接种环进行灭菌,以防杂菌污染。(4)制备培养基的操作步骤是:b计算→d称量→c溶化→e灭菌→a倒平板,A、B、C错误,D正确。 1.下表是一种细菌培养基配方,请回答下列问题。 成分 KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂 含量 1.4 g 2.1 g 0.2 g 10.0 g 1.0 g 15.0 g (1)该培养基的葡萄糖为微生物的生长繁殖主要提供________________________。 (2)该培养基属于__________________培养基(多选)。 A.液体 B.固体 C.鉴定 D.选择 E.天然 (3)如果要对培养基的菌落进行纯化,在培养基上划线操作中,操作的第一步及每次划线之 前都要灼烧接种环,目的是对接种环进行________。 (4)制备培养基的操作步骤是________。(用下列字母排序) a.倒平板 b.计算 c.溶化 d.称量 e.灭菌 A.a→b→c→d→e B.e→b→d→c→a C.b→d→c→a→e D.b→d→c→e→a * 2.(2017江苏大丰新丰中学月考,18)下图中甲是稀释涂布平板法中的部分操作,乙是平板划线法的操作结果。 下列叙述中错误的是( ) A.甲中涂布前要将涂布器灼烧,冷却后才能取菌液 B.对于浓度较高的菌液,如甲中的稀释倍数仅为102, 则所得的菌落不一定是由单一的细胞或孢子繁殖而成 C.乙培养皿中所得的菌落都符合要求 D.乙中的连续划线的起点是上一次划线的末端 C 【解析】灼烧后的涂布器如果没有冷却就接触菌液,会将菌体杀死,A正确;稀释倍数过低会导致多个菌体聚集在一起繁殖成菌落,B正确;平板划线法中最后一次划线的末端处形成的菌落才是由单一的细胞或孢子繁殖而成,这种菌落才符合要求,C错误;连续划线中,除了第一次划线外,每一次划线的起点是上一次划线的末端,目的是使得菌体密度越来越小,保证最后划线末端处的菌落是由单一的细胞或孢子繁殖而成。 * 3.请回答与大肠杆菌纯化培养有关的问题。 (1)制备
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