细胞冻存与细胞复苏标准操作规程(sop)..pdfVIP

背景知识 ： 细胞培养的传代及日常维持过程中， 在培养器具、 培养液及各种准备工作方面都需大量的耗 费，而且细胞一旦离开活体开始原代培养， 它的各种生物特性都将逐渐发生变化并随着传代 次数的增加和体外环境条件的变化而不断有新的变化。 因此及时进行细胞冻存十分必要。 细 胞冷冻储存在 -70 ℃冰箱中可以保存一年之久；细胞储存在液氮中，温度达 -196 ℃，理论上 储存时间是无限的。 原理 ： 细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融， 实验证明这样可以最大限度的保存细胞活力。 目前 细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂， 这两种物质能提高细胞膜对水的通透性， 加上 缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外， 减少细胞内冰晶的形成， 从而减少由于冰晶形成造 成的细胞损伤。 复苏细胞应采用快速融化的方法， 这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内 即融化，避