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目 录
TOC \o 1-5 \h \z \o Current Document 微生物学实验室规则 2
\o Current Document 实验一油镜的使用与保护 4
\o Current Document 实验二细菌的简单染色法 7
\o Current Document 实验三革兰氏染色法 9
\o Current Document 实验四培养基的制备 11
\o Current Document 实验五 微生物的分离和纯化 13
实验六 微生物学实验中常用玻璃器皿的洗涤与处理 15
\o Current Document 实验七 平板菌落计数法 20
\o Current Document 实验八 IMVIC与硫化氢试验 22
微生物学实验室规则
微生物学实验的对象有些为病原微生物, 具有传染性,因此要求进入实验室后必须严格遵守以下规则:
一、 书包、衣物等挂放于室外, 切勿带入室内。必需带入的书籍和文具等也应放置在非操作区, 以免污染。
二、 进入实验室应穿好隔离衣、戴好帽子。无菌操作时必须戴好口罩。
三、 禁止在室内饮食、吸烟或用嘴湿润标签、铅笔等。
四、 认真进行各项实验,严格掌握无菌技术。各个实验用品按指定地点存放,如吸过菌液的吸管、毛细滴
管投放入来苏消毒缸内;用过的玻片、 L形棒等放入装有消毒液的搪瓷缸内,绝对不要乱放在桌面上
或冲洗水槽中。
五、 实验中发生差错或意外事故时,应立即报告老师及时处理。切勿隐瞒或自作主张不按规定处理,如万
一发生有菌材料污染桌面、衣物等,应立即用抹布浸沾 2?3%来苏(或5%石炭酸液),泡在污染部位,
经半小时后方可抹去。如手上沾有活菌也用上述消毒液浸泡 10分钟左右,再以肥皂及自来水反复洗
净。
六、 要爱护室内仪器设备,按使用规则操作,并应节约使用实验材料。如不慎损坏了器材等,应报告教师。
七、 实验完毕应整顿桌面,关好水、电及煤气开关。需培养的材料要标记组别、姓名等,送入孵箱培育。 观察结果后的培养物等放污物筒,送消毒室处理、洗涮。
八、 实验完毕,脱下隔离衣、帽子,按要求将隔离衣反折、叠好,按座号放入柜内。然后用消毒液及自来 水洗手后再离开实验室。另应轮流值日,负责实验室的卫生,水电,煤气及门窗的安全。
九、未经许可不得将实验室内的物品及菌种携带出室外。
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实验一油镜的使用与保护图B- I显微锻
实验一
油镜的使用与保护
图B- I显微锻构造厨意图 I.憧崖I 2.栽物自』1. 4.楼锹套;5.鏡筒;
6.接日镇;7.转换器:8.接慟榛;9.聚光10. 飪聯光圈;LI. Jt圈固定器t 12.戡光髀升降螺旋; 13”反光權汀4”堀*节器.15.粗调节塞门幺标本夹
如夥比*
图皿-2 物惋的撫距*工柞距离和虹修光刪的关系
一、 目的要求
1、 学习并掌握油镜的原理和使用方法。
2、 复习普通台式显微镜的结构、各部分的功能和使用方法。
二、 显微镜的基本结构及油镜的工作原理
现代普通光学显微镜利用目镜和物镜两组透镜系统来放大 成像,故又常被称为复式显微镜。它们由机械装置和光学 系统两大部分级成(图川一 I)。在显微镜的光学系统中, 物镜的性能最为关键,它直接影响着显微镜的分辨率。而 在普通光学显微镜通常配置的几种物镜中,油镜的放大倍 数最大,对微生物学研究最为重要,与其他物镜相比,油 镜的使用比较特殊,需在载玻片与镜头之间加滴镜油。这主要有如下二方面的原因:
I、增加照明亮度
油镜的放大倍数可达 100 X,放大倍数这样大的镜 头,焦距很短,直径很小,但所需要的光照强度却最大
(图川一2)。从承载标本的玻片透过来的光线,因介质 密度不同(从玻片进入空气,再进入镜头 ),有些光线会
因折射或全反射,不能进入镜头 (图川一3),致使在使用 油镜时会因射入的光线较少,物像显现不清?所以为了 不使通过的光线有所损失,在使用油镜时须在油镜与玻
片之间加入与玻璃的折射率 (n=1.55)相仿的镜油(通常用香柏油,其折射
率 n=1.52)。
增加显微镜的分辨率
显微镜的分辨率或分辨力 (resolution Or resolving power)是 指显微镜能辨别两点之间的最小距离的能力。 从物理学角度看,
光学显微镜的分辨率受光的干涉现象及所用物镜性能的限制, 可表示为:
分辩率(最大可分辩距离) =入/2 NA
式中入=光波波长;NA=物镜的数值孔径值。
光学显微镜的光源不可能超出可见光的波长范围 (0.4 — 闭m乙 血彷q.f字对肱 策
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