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Applied Biosystems QuantStudio 3 5 实时荧 光定量PCR 仪V1.X 相对定量简易操作流程 相对定量简易操作流程 1、 双击桌面图标 开启QuantStudio Design Analysis Software， 或从开始菜单 All Programs Applied Biosystems Quant Studio Design Analysis Software Quant Studio Design Analysis Software 开启软件。 2、 进入主界面后，点击 “Create New Experiment ”。 3、 在“Properties”界面设置实验属性： a. 输入实验的名称； b. 选择仪器型号； c. 选择仪器的block （加热模块）类型； d. 选择实验类型：“Comparative CT (∆∆C )”； T e. 选择实验试剂类型：Taqman 探针法选择“Taqman reagents ”， SYBR 染料法选择“SYBR Green Reagents ”，其他选择 “Other”； f. 选择运行模式 （run mode ）：普通试剂选择“Standard ”；快 速试剂选择“Fast”。 相对定量简易操作流程 4、 点击“Next ”进入“Method ”界面，设置实验的运行程序： 相对定量简易操作流程 4.1、 （可选）设置多梯度反应温度： 1 单击 （Advanced Settings ）； ○ 2 勾选veriflex ， 3 然后更改block上相应的反应温度，相邻区域温度 ○ ○ 差异不能超过5℃。 注：QuantStudio 3 可设置3个梯度反应温度；上图为QuantStudio 5示例 图，可设置6个梯度反应温度。 相对定量简易操作流程 4.2、（可选）设置暂停程序：点击 1 图标， 2 勾选Pause， 3 设 ○ ○ ○ 置暂停前的反应循环数（Pause after cycles ），以及暂停后的温度 （Pausing Temperature，范围：4~30 ℃）。 相对定量简易操作流程 5、 点击“Next ”进入“Define ”界面， 1 设置待测基因名称 ○ （Target ）； 2 设置样品名称（Sample ）； 3 设置对照样本和内参基 ○ ○ 因。 5.1、在“Targets ”内点击“Add ”，添加待测基因。在“Target Name ” 中编辑基因名称；“Reporter”和“Quencher ”中选择所标记的荧光基 团及淬灭基团。对于“Quencher ”的选择，如果是M