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斑翅果蝇气味结合蛋白OBP56h、OBP69a 及OBP76a 与小分子化合物的结合特征
目录
摘要 i
Abstractiii
缩略语表v
第一章 文献综述 1
1.1 斑翅果蝇的研究概况 1
1.1.1 斑翅果蝇的发生与为害 1
1.1.2 斑翅果蝇的化学生态学 1
1.1.3 斑翅果蝇的防治 2
1.2 果蝇信息素 3
1.2.1 黑腹果蝇信息素 3
1.2.2 斑翅果蝇信息素 4
1.3 昆虫气味结合蛋白 4
1.3.1 黑腹果蝇气味结合蛋白 5
1.3.2 斑翅果蝇气味结合蛋白 5
1.4 研究目的与意义 6
1.5 创新点 6
技术路线 7
第二章 斑翅果蝇信息素结合蛋白筛选 8
2.1 材料与方法 8
2.1.1 转录组数据获取 8
2.1.2 转录组数据分析 9
2.2 结果与分析 9
2.2.1 转录组基因表达量 9
2.2.2 DsOBPs 表达量 11
2.3 讨论 11
第三章 斑翅果蝇DsOBPs 基因克隆、蛋白表达与纯化 13
3.1 材料与方法 13
3.1.1 实验材料 13
3.1.2 斑翅果蝇总RNA 提取 14
3.1.3 第一链cDNA 的合成 15
3.1.4 引物设计 15
3.1.5 斑翅果蝇DsOBPs 基因克隆 16
3.1.6 斑翅果蝇DsOBPs 序列分析 16
3.1.6 斑翅果蝇DsOBPs 的原核表达 17
3.1.7 斑翅果蝇DsOBPs 的纯化 18
3.1.8 蛋白浓度测定 19
3.2 结果与分析 20
3.2.1 斑翅果蝇DsOBPs 克隆与序列分析 20
3.2.2 蛋白表达与纯化 22
3.3 讨论 23
I
华中农业大学2020 届硕士研究生学位论文
第四章 斑翅果蝇DsOBP76a 与cVA 的结合机制 25
4.1 材料与方法 26
4.1.1 实验材料 26
4.1.2 荧光猝灭 26
4.1.3 同源建模 26
4.1.4 分子对接 27
4.1.5 虚拟突变 27
4.2 结果与分析 28
4.2.1 荧光猝灭 28
4.2.2 同源建模 30
4.2.3 分子对接 32
4.2.4 虚拟突变 33
4.3 讨论 34
第五章 斑翅果蝇DsOBPs 的结合特性分析 36
5.1 材料与方法 36
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