两种草坪草高温应答机理及F-box基因功能解析.pdfVIP

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2021-01-11 发布于江苏
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两种草坪草高温应答机理及F-box基因功能解析.pdf

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两种草坪草高温应答机理及F-box 基因功能解析目录摘要i Abstractiii 缩略词表（Abbreviations）vi 1前言1 1.1冷、暖季型草坪草抗热性差异1 1.2 高温胁迫对植物生理水平的影响2 1.2.1高温对光合作用的影响2 2+ 1.2.2 高温对Ca 信号的影响3 1.2.3 高温对ROS信号的影响3 1.2.4 高温对生理代谢的影响4 1.3 高温对植物转录水平的影响5 1.3.1高温对HSF-HSP 途径的影响5 1.3.2 高温对转录因子的影响6 1.3.3 高温对功能基因的影响7 1.4 高温对蛋白质翻译后修饰的影响7 1.4.1泛素蛋白酶体系统8 1.4.2F-box 基因研究进展 10 1.5本研究的目的和意义11 2 材料与方法12 2.1实验材料12 2.1.1植物材料12 2.1.2 试剂和仪器12 2.2 高温胁迫对狗牙根和高羊茅生长及生理指标的影响12 2.2.1高温胁迫对狗牙根和高羊茅生长的影响12 2.2.2 叶片电导率13 2.2.3脯氨酸含量的测定13 2.2.4 可溶性糖含量的测定13 2.2.5 POD 14 过氧化物酶（）活性测定 2.2.6 SOD 14 总超氧化物歧化酶（）活性测定 2.2.7 MDA 14 丙二醛（）含量的测定 2.2.8生理指标的相关分析14 2.3狗牙根和高羊茅E3泛素连接酶F-box 基因的克隆和功能解析14 2.3.1RNA-seq 数据分析14 2.3.2 实时荧光定量PCR 测定高温下F-box 基因表达水平的变化15 2.3.3 目的基因的克隆17 2.3.4 T 19 目的片段与载体的连接 2.3.5连接产物转化19 2.3.6 菌落PCR 鉴定20 2.3.7序列比对与进化树分析20 2.3.8过表达载体构建20 I 华中农业大学2020 届研究生学位（毕业）论文 2.4 CdF-box1亚细胞定位24 2.5狗牙根CdF-box1和高羊茅FaF-box1启动子的克隆和分析25 2.5.1全基因组DNA 提取25 2.5.2FNPI-PCR 方法克隆启动子26 2.6FaF-box1基因互作蛋白的筛选29 2.6.1酵母双杂实验材料准备29 2.6.2Y2H Gold 酵母感受态的制备29 2.6.3 自激活检测30 2.6.4 酵母文库筛选31 3 结果和分析33 3.1高温胁迫对狗牙根和高羊茅生长及生理指标的