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发掘与水稻SD1相关的“隐藏”株高基因.pdf

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发掘与水稻SD1 相关的“隐藏”株高基因 目录 摘要 i Abstract ii 缩略词表iii 1 前言 1 1.1 研究问题的由来 1 1.2 水稻SD1 基因研究进展 2 1.3 水稻株高研究进展 2 1.3.1 水稻株高的遗传研究 2 1.3.2 水稻株高的育种研究 3 1.4 赤霉素途径对株高的调控 4 1.4.1 赤霉素的发现 4 1.4.2 赤霉素的生物合成 5 1.4.3 赤霉素的信号转导 7 1.4.4 赤霉素的代谢失活 8 1.5 其它植物激素对株高的调控 9 1.6 BSA 法概述 11 1.6.1 BSA 法的原理 11 1.6.2 BSA 分析方法 12 1.7 研究目的与意义 13 2 材料和方法 14 2.1 研究材料 14 2.1.1 试验亲本材料 14 2.1.2 转基因材料 15 2.2 试验方法 15 2.2.1 田间种植及性状考察 15 2.2.2 F2:3 群体大样DNA 提取 16 2.2.3 BSA 测序数据分析 16 2.2.4 DNA 小样提取与PCR 扩增 17 2.2.5 定位群体及转基因材料基因型鉴定 18 I 华中农业大学2020 届硕士研究生学位论文 2.2.5 引物设计、合成以及测序 19 2.2.6 RNA 提取、cDNA 反转录以及Real-time PCR 19 2.2.7 载体构建 21 2.2.8 激素处理 22 2.2.9 数据统计分析 22 3 结果与分析 23 3.1 极端群体的表型及构建 23 3.2 利用NGS-BSA 定位株高位点 24 3.2.1 测序数据质量评估 24 3.2.2 SNP/InDel 位点的分布 25 3.2.3 QTL 定位结果 26 3.3 利用染色体片段代换系验证位点效应 27 3.3.1 利用染色体片段代换系验证qPH6 27 3.3.2 利用染色体片段代换系验证qPH8-1 28 3.4 qPH8-1 的定位与转基因验证 29 3.4.1 qPH8-1 的初步定位 29 3.4.2 qPH8-1 候选基因序列分析 31 3.4.3 转基因验证CYTB6、CYTB559、CYTF 32 3.5 CYTB6、CYTB559、CYTF 受GA3 诱导 33 4 讨论 35 4.1 测序群体的选择 35 4.2 利用NGS 和BSA 方法定位QTL 的优势 35 4.3 CYTB6、CYTB559、CYTF 是新的株高基因 36 4.4 CYTB6、CYTB559、CYTF 基因可能参与赤霉素代谢途径 37 4.5 qPH8-1 在育种中的应用 37 参考文献 38 附录Ⅰ试验所用引物信息 52 附录Ⅱ攻读硕士期间的研究成果 53 致谢 54

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