白细胞和红细胞检测.docxVIP

小鼠血常规检测： 包括血红蛋白测定 (Hb)、红细胞 (RBC)计数、白细 胞（ WBC) 计数及白细胞分类计数 (DC，以比值计） 4 项。 白细胞分为 5 类：一是中性粒细胞 (Gran)，二是淋巴细胞 (Lym)，三 是嗜酸性粒细胞，四是嗜碱性粒细胞，五是单核细胞。 白细胞计数 1、白细胞稀释液： 取冰醋酸 2.0mL 和 10g/Ｌ亚甲蓝（或结晶紫）数滴或  1%龙 胆紫 1 mL，混匀，加蒸馏水至 100mL 。(用滤纸过滤 ) 2、取小试管１支，加入白细胞稀释液 0.38ｍ l。 3、用微量吸管准确吸取抗凝血 20ul，擦去管尖外部余血，立即将吸管插入盛有 稀释液的试管底部，轻轻将血放出，并吸取上清液漱洗吸管 2 次～ 3 次，注意每 次不能冲浑稀释液，最后用手振摇试管混匀 （完全变为棕褐色）。 4、充液：将计数板和盖玻片擦净，盖片盖在计数池上，用毛细滴管或玻璃棒取 已混匀的细胞悬液 1 滴，充入计数池与盖玻片间的缝隙中，静置 2min～ 5min， 待白细胞下沉后于显微镜下计数。 5、计数：用低倍镜依次计数四角的  4 个大格内的白细胞数。 对于压线的白细胞， 应采取数上不数下；数左不数右（左、上计入，右、下弃去）的原则，保证计 数域的一致性，使计数准确。 6、计算 四个大格白细胞数 白细胞数／Ｌ＝ ————————  ×10 ×20 ×106 4 式中： ÷4 得每个大格（即 0.1 μl）内白细胞平均数 ×10 因一大格容积为 0.1 μl ，换算为 1μ l ×20 血液稀释倍数。 ×106 将 1μl 换算为 1Ｌ。 稀释倍数＝（溶质＋溶剂） /溶质 注意：体积单位需一致后方能运算。 材料： 血细胞计数盘及盖玻片、显微镜、一次性定量采血管 (20ul) 、小试管、 刻度吸管、白细胞稀释液。 红细胞计数 1、红细胞稀释液：赫姆（ Hayem）稀释液，称取氯化钠（调渗透压） 0.5g, 结晶 硫酸钠 2.5 g（提高相对比密和防止细胞粘连） , 氯化高汞 0.25 g（防腐剂），用 蒸馏水溶解至 100mL。 2、取小试管 1 支，加红细胞稀释液 2ml。 3、用干燥微量吸管吸取抗凝血 10μ ，擦去管外余血，轻轻加至红细胞稀释液底l 部，再轻吸上清液清洗吸管 2～3 次，立即混匀。 4、充池 混匀后用微量吸管将红细胞悬液冲入计数池，室温下平放  2～ 5 分钟， 待细胞下沉后于显微镜下计数。 5、计数 用高倍镜依次计数中央大方格内  4 角和正中 5 个中方格内的红细胞数。 6、计算 红细胞 /L=N ×25/5 ×10×106 ×200=N× 1010 白细胞分类计数 某种白细胞数／ L＝某种白细胞％ ×白细总数／ L