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教学反馈 1.凝胶色谱法是根据( )分离蛋白质的有效方法。 A分子的大小 B相对分子质量的大小 C带电荷的多少 D溶解度 2.缓冲液的作用是:在一定范围内,抵制外界的影响来维持( )基本不变。 A温度 B pH C渗透压 D氧气浓度 B B 3.电泳是指带电粒子在电场的作用下向着与其所带电荷( )的电极移动。 A相同 B相反 C相对 D相向 4. 哺乳动物和人的成熟的红细胞中的( )与氧气的运输有关。 A血红蛋白 B肌红蛋白 C肌动蛋白 D肌球蛋白 B A 5.血液由血浆和各种血细胞组成,其中( )的含量最多。 A白细胞 B血小板 C红细胞 D淋巴细胞 6.为防止血液凝固,在采血容器中要预先加入抗凝血剂( )。 A. NaCl B.甲苯 C.蒸馏水 D.柠檬酸钠 C D 7.将搅拌好的混合液转移到离心管中,离心后,可以明显看到试管中的溶液分为4层,其中第3层是( ) A无色透明的甲苯层 B脂溶性物质的沉淀层 C血红蛋白的水溶液 D其他杂质的暗红色沉淀物 C 1、随着人类跨入蛋白质组时代,对蛋白质的研究和应用越来越深入,首先要做的一步是 A 弄清各种蛋白质的空间结构 B 弄清各种蛋白质的功能 C 弄清各种蛋白质的合成过程 D 获得高纯度的蛋白质 练习巩固 2、用凝胶色谱法分离蛋白质的过程中,关于蛋白质的叙述,正确的是 A 相对分子质量较小的蛋白质行程大于相对分子质量较大的蛋白质 B 相对分子质量较小的蛋白质行程小于相对分子质量较大的蛋白质 C 相对分子质量较小的蛋白质行程等于相对分子质量较大的蛋白质 D 二者根本无法比较 人教版高中生物选修一专题5课题3血红蛋白的提取和分离课件共38张PPT 血红蛋白只存在于红细胞内,含有四条肽链,每条肽链环绕一个亚铁血红素基团,此基团可携带一分子氧或一分子二氧化碳,血红蛋白因含有血红素而呈红色。 血红蛋白 两个α-肽链 两个β一肽链 四个亚铁血红素基团 血红蛋白的特点: Fe2+ 一、基础知识: 1 、分离生物大分子的基本思路是什么? 本课题我们将利用血红蛋白与杂质蛋白哪方面的差异进行提纯? 选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。 2、蛋白质提取与分离的依据:不同种类蛋白质的物理化学性质不同: 蛋白质形状、大小、电荷性质和多少、溶解度、吸附性质、对其他分子亲和力等千差万别。从而分离不同种类的蛋白质。 一、基础知识--蛋白质提取和分离原理 提取分离方法 凝胶色谱法 凝胶电泳法 3 、分离不同的蛋白质方法: 2、原理: 1、材料--- 实际上就是一些微小的多孔球体。小球内部有许多贯穿的通道. 大多数是由多糖类化合物构成,如葡聚糖、琼脂糖。 凝胶 (一)凝胶色谱法 (分配色谱法): 根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法 当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时, 相对分子质量较小的蛋白质:容易进入凝胶颗粒内部的通道,路程较长,移动速度较慢; 而相对分子质量较大的蛋白质:无法进入凝胶颗粒内部的通道,只能在凝胶外部间隙中移动,路程较短,移动速度较快。 3、具体过程: 一、基础知识---蛋白质分离和提取的原理 分子量 大 小 直径大小 运动方式 运动速度 运动路径 洗脱次序 一、基础知识---蛋白质分离和提取的原理 大于凝胶颗粒孔隙 直径,被阻挡在颗 粒的外面 小于凝胶颗粒孔 隙直径,可以进 入颗粒内部 垂直向下移动 垂直向下移动, 无规则扩散进 入颗粒内部 较快 较慢 较短 较长 先从凝胶柱洗脱 出来 后从凝胶柱洗脱 出来 1 、什么是缓冲液? 2、 缓冲液的作用是什么? 【思考2 】: (二)、缓冲溶液- 在一定的范围内,凡是能够抵制外加少量强酸或强碱的影响使原来溶液PH值基本保持不变的混合溶液。由弱酸和相应的强碱弱酸盐组成。如H2CO3/NaHCO3,醋酸/醋酸钠, NaH2PO4/Na2HPO4等 能够抵制外界的酸和碱对溶液PH值的影响,维持PH基本不变。 洗脱剂 3、 缓冲液是如何配制的? 4、 本实验加的是什么缓冲液?为何要加缓冲液? 通常由1-2 种缓冲剂溶解于水中配制而成。调节缓冲剂的使用比例就可以制得在不同pH范围内使用的缓冲液。 磷酸缓冲液 在本课题中使用的缓冲液是:_________
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