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植物组织可溶性总糖的测定
2015-8-16
一、目的：测定植物组织中总糖 （可溶性碳水化合物），用以研究体内能量储藏
和渗透物质积累情况，检测范围为 10-100ug/ml。因淀粉在超过 45 度可能糊化
水解，如果已知样品含淀粉较多，应考虑 70%乙醇提取或冷水提取（不包括淀粉）
或 1:4 盐酸水解 （包括淀粉）。
二、样品前处理：鲜样要称重后 105度烘干，称干重，计算含水量，粉碎。
三、可溶性总糖的提取：
干样测定完含水量后，称取样品 0.25g，或鲜样 2.50g，放入 250ml 消煮管中，
加水 100ml，调整消煮炉温度约 150-160度，煮沸 30 分钟，冷却，加水定容，
取上清液过滤，滤液或离心上清液以水稀释适当倍数 （5-10倍左右）待测。
注：西红柿总糖：取 1ml 匀浆，用水稀释 1000倍，取 2ml 测定。
四、测定
4.5.1试剂配制：
4.5.1.1 80%硫酸：200ml水加入到1000ml烧杯中，在搅拌和水冷条件下，缓慢加
入800ml浓硫酸，冷却备用。
4.5.1.2 蒽酮试剂：取2g蒽酮溶解到1000ml 80% （V/V）硫酸中，搅拌均匀，冷
却后备用。蒽酮试剂当日配制使用。
4.5.1.3 100μg/ml 葡萄糖标准液制作：称取0.0100g无水葡萄糖 （分子量180.16）
或者1水葡萄糖 （分子量198.18）0.0110g溶于水中，加0.5ml浓硫酸，定容100ml。
4.5.2标准曲线
浓度 μg/ml(ppm) 0 20 40 60 80 100 样品ml
葡萄糖标准液 （ml） 0 0.4 0.8 1.2 1.6 2
2
水 2 1.6 1.2 0.8 0.4 0
蒽酮试剂ml 8
4.5.3 总糖测定：取2ml提取液于试管中，在冷水浴中加8ml蒽酮试剂，沸水浴5
分钟，取出迅速冷却，于625nm测定含糖量。同时取上表标准液2ml加8ml蒽酮同
样测定。如果含糖量太低，可适当减低稀释倍数，如果糖含量太，可适当增加稀
释倍数。此方法适于含糖量1-10%样品的测定，如果超过此含量，需稀释后测定，
低于此含量，需增加称量样品。
4.5.4计算：糖% （干重） 测定浓度 （ppm）*稀释倍数*提取体积ml/10000/w （g）
注意事项：
1、本方法能够测定所有可溶性碳水化合物，包括淀粉、纤维素等，不能有残渣
进入分析系统。
2、加热时间对测定结果有影响。少量样品测定可以使用浓硫酸配制蒽酮试剂，
加入样品后直接水浴，但如果样品量大，操作时间较长，需用80%硫酸配制蒽酮
试剂，以减少发热，但要保证硫酸终浓度。
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