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（建筑工程管理）专题基 因工程教案 专题 1 基因工程 1.1DNA 重组技术的基本工具 壹、教学目 1.知识方面 简述DNA 重组技术所需三种基本工具的作用。 2.情感态度和价值观方面 认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新。 二、教学重点和难点 1.教学重点 DNA 重组技术所需的三种基本工具的作用。 2.教学难点 基因工程载体需要具备的条件。 三、教学方法 讲授法，对话法 四、教学课时 2 五、教学过程 基因工程的概念： “基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外 DNA 重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的 生物类型和生物产品。” 壹、限制性核酸内切酶—— “分子手术刀” ⑴来源 ⑵作用 〖问题〗1.什么叫磷酸二酯键？ 〖生思考讨论回答，师提示〗3,5 磷酸二酯键是核酸中核苷酸的连接方式，组成 了核酸的壹级结构。于核酸中壹个核苷酸核糖上第3 位的羟基和下壹个核苷酸核糖上 第 5 位的磷酸羟基脱水缩合成酯键，该酯键称 3,5 磷酸二酯键。若干个核苷酸间以 3′,5′磷酸二酯键（如下图）连接成的多核苷酸链为核酸。于链的壹端的壹个核苷 酸，其核糖上第 5 位连接的磷酸只有壹个酯键，称此核苷酸为 DNA 链的5′磷酸末端 或5′端。另壹端核苷酸上第 3 位的羟基是自由的，所以此核苷酸称为3′羟基末端 或3′端。链内的核苷酸第 5 位上的磷酸已形成二酯键，第 3 位上的羟基也已参和二 酯键的形成，故称核苷酸残基。 图DNA 上的磷酸二酯键 〖寻根问底1〗2.根据你所掌握的知识，你能分析出限制酶存于于原核生物中的作用 是什么吗？ 〖生思考讨论回答，师提示〗：原核生物容易受到自然界外源DNA 的入侵，可 是，生物于长期的进化过程中形成了壹套完善的防御机制，以防止外来病原物的侵害。 限制酶就是细菌的壹种防御性工具，当外源DNA 侵入时，会利用限制酶将外源 DNA 切 割掉，以保证自身的安全。所以，限制酶于原核生物中主要起到切割外源 DNA 、使之 失效，从而达到保护自身的目的。 〖问题〗3.联系你已有的知识，想壹想，为什么细菌中限制酶不剪切细菌本身 的DNA ？ 〖生思考讨论回答，师提示〗迄今为止，基因工程中使用的限制酶绝大部分均是从细 菌或霉菌中提取出来的，它们各自能够识别和切断DNA 上特定的碱基序列。细菌中限 制酶之所以不切断自身 DNA ，是因为微生物于长期的进化过程中形成了壹套完善的防 御机制，对于外源入侵的 DNA 能够降解掉。生物于长期演化过程中，含有某种限制酶 的细胞，其DNA 分子中或者不具备这种限制酶的识别切割序列，或者通过甲基化酶将 甲基转移到所识别序列的碱基上，使限制酶不能将其切开。这样，尽管细菌中含有某 种限制酶也不会使自身的 DNA 被切断，且且能够防止外源 DNA 的入侵。 ⑶结果 ①黏性末端 ②平末端 〖问题〗4.限制酶所识别的序列有什么特点？ 〖生思考讨论回答，师提示〗限制酶所识别的序列，无论是6 个碱基仍是 4 个 碱基，均能够找到 壹条中心轴线（如右图），中轴线俩侧的双链DNA 上的碱基是反向对称重复排 列的。 〖思考和探究〗1.限制酶于DNA 的任何部位均能将DNA 切开吗？以下是四种不 同限制酶切割形成的DNA 片段： (1)…CTGCA(2)…AC(3)GC… （4）…G(5)G…(6)…GC …G…TGCG……CTTAAACGTC……CG (7)GT…(8)AATTC… CA…G… 你是否能用 DNA 连接酶将它们连接起来？ 〖生思考讨论回答，师提示〗答： 任何壹种限制酶均只识别和切断特定的核苷酸序列，这是由限制酶的性质所决 定的。 2 和 7 能连接形成…ACGT…4 和 8 能连接形成…GAATTC… …TGCA… ；…CTTAAG… ； 3 和 6 能连接形成…GCGC…1 和 5 能连接形成…CTGCAG… …CGCG… ；…GACGTC… 。 二、DNA 连接酶—— “分子缝合针”