实验十---从自然界中分离筛选优良微生物菌种.pdfVIP

实验十 从自然界中分离筛选优良微生物菌种 一．实验目的 学会用倾注（涂布）法从甜酒曲中分离纯化优良根霉糖化菌株。 二．实验原理 甜酒药中的米根霉是优良的糖化菌种，有时也见华根霉。本实验采 用平板涂布法从甜酒曲中分离纯化优良的根霉糖化菌株，为制备纯种 甜酒曲提供优良的菌种。 三．实验材料及用具 材料 安琪甜酒曲、马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA)、牛肉膏 蛋白胨培养基（PCA)、孟加拉红培养基、生理盐水 用具 涂布器、酒精灯、具塞试管、移液枪 四．实验流程 取样→10 倍梯度稀释→0.1mL 涂布 PDA 平板、PCA 平板、孟加 拉红平板（倾注 2 板）→28℃恒温培养 3d 观察结果 在电子天平上取 2.0g 安琪酒曲; 将酒曲倒入盛有 8mL 无菌生理盐水的具塞试管中，震荡均匀，制 得 10-1 稀释液，然后用移液枪移取 1mL10-1 稀释液于另一管盛有 9ml 无菌生理盐水的试管中，制得 10-2 稀释液，同理依次制得 10-3 、 10-4 、10-5 稀释液； 用移液枪分别移取各稀释度菌液0.1ml,注入已经冷却的 PDA 平板、 PCA 平板和孟加拉红平板上，用稀释涂布器涂抹均匀，另用倾注法 制作 2 个孟加拉红平板； ④将制作好的平板写上名称、组别及日期，置于 28℃恒温培养箱中培 养 3d,观察结果。 五．实验结果 PCA 平板： 现象：培养基表面布满大量扩散性生长菌落，呈蜘蛛网状， 相互连接交错，菌丝发达 现象：相较于 10-1 稀释度平板，此平板中间大部未有菌落生 长，只在平板边缘两处有菌落出现，生长情况良好。 分析：10-1 稀释度应该是此次分离甜酒曲中根霉的最适浓度， 因为当稀释到 10-2 时，平板上几乎没有大量菌落生长。 PDA: -1 -3 -1 现象：在三个连续梯度的平板中，10 、10 中均有菌落生长，其中 10 -3 -2 中有大量菌落，10 中菌落较少，而 10 平板中却几乎没有可见菌落。 -2 分析： 接种过程中，10 平板可能未冷却至 46℃ ，以致温度过高将 菌液中的微生物全部烫死。 孟加拉红培养基： 注意事项： 操作过程中应严格遵守无菌操作； 注意在接种前一定要待培养基完全冷却，以免菌种被烫死； 培养时将平板倒置，以免冷凝水滴入培养基内，冲散菌落。