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第二章（10）植物花药（花粉）培养 课 题 植物花药（花粉）培养 课 程 1 了解植物花药和花粉培养的意义 教 学 2 掌握花药培养的过程 3 掌握单倍体加倍的方法 目 标 教学重点 花药培养的过程 教学难点 花药培养的过程 课 型 课堂讲授 授课时数 3 使用教具 多媒体 1花药培养 是将花粉发育至一定阶段的花药接种到人工培养基上进行培养， 以形成花粉胚或愈伤组 织进而分化成植株的技术。 2花粉培养 是将花粉从花药中分离出来，接种到人工培养基上进行培养，以形成花粉胚或愈伤组织 进而分化成植株的过程。 3花药培养过程 3.1预处理 低温冷藏是最常用的方法。烟草 7?9C , 7?14d ;黑麦1?3 C , 7?14d。 3.2表面消毒 用70%酒精喷洒或擦拭花器或包被着麦穗的叶鞘表面，即可以达到灭菌的要求。 3.3接种 在无菌的条件下把雄蕊上的花药从花丝上摘下，水平地放在培养基上进行培养。 不要使花药受到损伤，否则会刺激花药壁形成二倍体愈伤组织。接种的“密度效应”，要 有一个合理的群体数量。 培养形成花粉植株。 花粉--- 愈伤组织 --- 苗；花粉 --- 胚状体 --- 苗。 培养方式：①琼脂固化培养基表面培养；② 30%Ficoll的液体培养基表面漂浮培养; ③固 - 液双层培养。 花药培养脱毒 1974 年日本：花药培养可以脱除草莓病毒； 4.1花药采取时期 单核期：花蕾4?6mm花药1mm. 花药诱导愈伤组织培养基 MS+IAA4mg/L+BA2mg/L+KT2mg/L蔗糖 30g+琼脂 7g/L 增殖分化培养基 MS+GA1mg/L+IBA0.2mg/L+BA1mg/L蔗糖 30g+琼脂 7g/L 生根培养基 1/2MS+IBA0.2mg/L+ 活性炭 3g/L+ 蔗糖 20g+琼脂 7g/L 单倍体植株染色体加倍的方法 自然加倍 花粉细胞核有丝分裂或核融合，染色体可自然加倍，获得纯合二倍体。 人工加倍 0.4%用秋水仙素处理单倍体植物，可使染色体加倍（溶液浸苗、处理愈伤组织和用含 秋水仙素的羊毛脂涂抹单倍体植株的顶芽、腋芽，可得到能结实的二倍体植株） 0.4% 将单倍体植株诱导的愈伤组织反复继代培养，再分化可得到二倍体植株。 花药和花粉培养的应用 克服后代分离，缩短育种周期； 有利于筛选隐性突变体，选择效率高 ; 有利于隐性基因控制性状的选择 ; 快速获得自交系的超雄株 本节小结：在单倍体细胞中只有 1 个染色体组，表现型和基因型是一致的，一旦发生 突变，无论是显性还是隐性，在当代都可以表现出来，因此单倍体是体细胞遗传研究和突 变育种的理想材料。通过本节的学习，我们要掌握花药培养的过程，还有单倍体加倍技术。 在品种间杂交育种程序中，通过 F1 代花药培养得到的单倍体植株后，经染色体加倍后 成为纯和二倍体，从杂交到获得不分离的杂种后代单株只需要 2 个世代，和常规育种方法 相比，显著缩短了育种年限。 思考题： 1 花药培养的过程是什么 ? 2 单倍体加倍的方法有哪些？