生物选修三幻灯片.ppt

;2;3;;;;7;;;;11;;13;14;一、限制性核酸内切酶——“分子手术刀”;1.来源：主要从原核生物中分离纯化出来，它是一类酶，不是一种酶。 2.化学本质：蛋白质。 3.作用特点 (1)具有专一性。具体表现在如下两个方面： ①识别双链DNA分子中特定的核苷酸序列。 ②切割特定序列中的特定位点。 (2)可用于DNA的切割获取目的基因和切割载体。 4.切割的部位：磷酸二酯键。;5.产物：黏性末端和平末端。 (1)黏性末端：是限制性核酸内切酶在识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别切开时形成(错位切)，如图所示： ;(2)平末端：是限制酶在识别序列的中心轴线处切开时形成的(平切)，如图所示：; ①不同DNA分子用同一种限制酶切割形成的黏性末端都相同；同一个DNA分子用不同限制酶切割，产生的黏性末端一般不相同。另外，不同限制酶切割形成的黏性末端，如互补则可以相互重新配对。 ②限??酶的识别序列与被作用的DNA序列是不同的。前者一般由6个核苷酸组成，少数由4、5或8个核苷酸组成；后者是双链序列。 ③判断黏性末端是否由同一种限制酶切割形成的方法是：将黏性末端旋转180°，应该是完全相同的结构。;【典例1】限制酶是一种核酸切割酶，可辨识并切割DNA分子上特定的核苷酸序列。如图为四种限制酶BamHⅠ，EcoRⅠ，HindⅢ以及Bgl Ⅱ的辨识序列。箭头表示每一种限制酶的特定切割部位，其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合，其正确的末端互补序列应该为 ;A.BamHⅠ和EcoRⅠ；末端互补序列-AATT- B.BamHⅠ和HindⅢ；末端互补序列-GATC- C.EcoRⅠ和HindⅢ；末端互补序列-AATT- D.BamHⅠ和BglⅡ；末端互补序列-GATC- 【解题关键】首先要明确不同的限制酶有特定的识别序列，其次要分析切割下的黏性末端能否互补，另外要注意互补序列的正确书写。;【标准解答】选D。A项中BamHⅠ酶切出的末端序列为 -GATC-，EcoRⅠ酶切出的末端序列为-AATT-，两者不互补；B项HindⅢ酶切出的末端序列为-AGCT-，与BamHⅠ酶切出的末端序列不互补；同理可推，C项中也不互补，只有D项中才互补。;【互动探究】(1)分析上述不同限制酶具有不同的识别序列，说明限制酶具有什么特点。 提示：酶具有专一性。 (2)不同限制酶切割形成的黏性末端能发生粘合吗？借助于什么方式来完成粘合？ 提示：可以。前提是不同限制酶切割形成的黏性末端要互补，通过碱基相互配对形成氢键的方式来完成粘合。; 【变式训练】现有一长度为3 000个碱基对(bp)的线性DNA分子，用限制酶切后，进行凝胶电泳，使降解产物分开。用酶H单独酶切，结果如图1。用酶B单独酶切，结果如图2。用酶H和酶B同时酶切，结果如图3。该DNA分子的结构及其酶切图谱是( );【解析】选A。两种酶单独切割时形成两段或三段，故酶H和酶B分别有一个和两个切点，同时切割应该形成四段，由于其中一段长度相同，因此电泳时仍见到三段。;二、DNA连接酶——“分子缝合针”;1.作用的化学键：磷酸二酯键。 2.作用目的：将切下的黏性末端或平末端重新拼接、缝合，形成新的DNA分子。;3.DNA连接酶与限制性核酸内切酶的比较 (1)区别;(2)两者的关系可表示为： ;4.DNA连接酶与DNA聚合酶的比较; ①DNA连接酶无识别的特异性，凡两个黏性末端(或平末端)能互补配对，DNA连接酶就能催化其相互缝合，重新形成DNA分子。 ②DNA连接酶的活性发挥受温度、pH等因素的影响。;【典例2】下列有关DNA连接酶的叙述正确的是 ①催化具有相同的黏性末端的DNA片段之间连接 ②催化具有不同的黏性末端的DNA片段之间连接 ③催化两个黏性末端互补碱基间氢键的形成 ④催化脱氧核糖与磷酸之间的磷酸二酯键的形成 A.①② B.③④ C.①④ D.②③; 【解题关键】本题解题关键是通过比较选项的不同点，并结合DNA连接酶的作用机理即作用部位是磷酸二酯键，作用对象是相同的黏性末端来进行分析。 【标准解答】选C。DNA连接酶催化相同(即互补)的黏性末端进行连接，而不是不同的黏性末端的任意连接。DNA连接酶作用的部位是磷酸二酯键，不是氢键。;【变式训练】关于磷酸二酯键说法正确的是( ) A.只有目的基因中存在 B.只有质粒中存在 C.DNA单链或双链分子中都存在 D.只存在于双链DNA分子中 【解析】选C。在DNA的分子结构中，双链DNA分子的每一条链及单链DNA分子中相邻脱氧核苷酸之间是以磷酸二酯键相连的，故C正确。;三、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”;