发酵过程控制技术 01-06 菌种的选育、保藏与扩大培养 菌种的选育、保藏与扩大培养.doc

发酵工艺原理 第六章 PAGE 1 子情境：引导文 菌种的选育、保藏与扩大培养 第六章 菌种的选育、保藏与扩大培养 第一节 发酵工业对菌种的要求 目前，随着微生物工业原料的转换和新产品的不断出现，势必要求开拓更多新品种。尽管微生物工业用的菌种多种多样，但作为大规模生产，对菌种先则有下列要求： (1)　生长繁殖快，代谢能力强 (2)　菌种遗传特性稳定，不易变异退化，且菌种所要求的工艺控制比较粗放，易于控制培养条件，有利于发酵生产运行和产品质量的稳定。 (3)　副产物少，提高底物的有效转化率，目的产物分离容易，有利于降低提取成本和提高产品质量。 (4) 抗杂菌和嗜菌体的能力强 （5）菌种不是病原菌，对人、动物、植物和环境都不具有潜在的危害性 （6）菌种具备利用广泛来源原料的能力，并对发酵原料成分波动的敏感性尽可能小。 在筛选所需的菌种时应考滤的一些重要的指标： （1） 菌种的营养特征： （2） 菌种的生长温度： （3） 菌种对所采用的设备及生产过程的适应性： （4） 菌种的稳定性： （5） 产物的得率和产物的浓度： （6） 产物容易回收： 能满足（3）~（6），则有希望成为效益较高的生产菌种。 第二节 优良菌种选育 工业生产中微生物育种的基本方法包括自然选育、诱变育种、杂交育种、原生质体融合技术、基因工程技术等。（抗性菌种选育、代谢控制育种及基因重组定向育种等）。 就是要改善菌种的特性，使能提高产量、改进质量、降低成本、改进工艺、方便管理及综合利用等。 代谢控制育种主要有两个方面： 改变代谢通路的育种 改变代谢自动调节系统的育种 一、自然选育 采样 增殖培养 从自然界分离菌株 纯种分离 性能鉴定 从自发突变中获得菌株 采样 ↓ 增殖培养 ↓ 第一次平板分离→第一次原种斜面 ↓ 第二次平板分离→第二次原种斜面 ↓ 第三次平板分离→第三次原种斜面 ↓ 第四次平板分离→第四次原种斜面 ↓ 初步工艺条件摸索→ 复筛?种子培养 ↓ 较优菌株1－3株 保藏及进一步做生产性能试验 某些必要试验和毒性试验等 或作为育种的出发菌株 自然状态下，碱基对发生自然突变的机率为10-8～10-9 自然突变有两种情况： 一种是我们生产上所不希望看到的，表现为菌株的衰退和生产质量的下降，这种突变成为负突变。 另一种是我们生产上希望看到的，对生产有利，这种突变成为正突变。 自然选育在工业生产上的意义： 问题：高产菌株是正突变高，还是负突变 回复突变：高产菌株在传代的过程中，由于自然突变导致高产性状的丢失，生产性能下降，这种情况我们称为回复突变。 自然选育虽然突变率很低，但却是工厂保证稳产高产的重要措施。 二、诱变