改性海藻酸钠AKK菌微胶囊的制备及其性质研究.pdfVIP

摘 要 摘要 问题与目的：Akkermansia muciniphila 作为新型益生菌具有广阔的医学前景，AKK 菌是嗜黏蛋白阿克曼氏菌（Akkermansia muciniphila ）的简称，近年来逐渐成为研究热 点。但是，Akkermansia muciniphila 对胃肠道环境和氧气非常敏感，这对其应用造成了 极大阻碍。海藻酸钠是迄今为止使用最广的微胶囊壁材，然而，不做处理的海藻酸钠存 在很多缺陷，比如过高的分子量，容易造成细胞的渗漏，机械强度低下等，这些因素都 不利于其发挥益生与保护作用。因此，本研究探索了改造海藻酸钠并结合其他益生元 来保护AKK 菌活性的可能性。 实验方法：在本实验中，使用琥珀酸酐改良海藻酸钠来包封 AKK 菌并添加表没食 子儿茶素没食子酸酯（EGCG），来保护益生菌活性和增加抗逆性。采用喷雾干燥技术制 作了微胶囊，使用 MTT 比色法对比了喷雾干燥后益生菌的保留活性。此外，我们利用 扫描电子显微镜测定了微胶囊和改性材料的表面物理性质。同时，为了模拟喷雾干燥 的微胶囊用于液体产品中储存和运输的可能性，我们利用激光纳米粒度仪测试了水系 统中的微胶囊的均匀性与稳定性。为了测试微胶囊产品的抗逆性，检测了几种不同微 胶囊的抗氧化性，长期储存实验期间的活力变化，以及封装在不同材料中的益生菌对 胃肠液的抵抗力。为了验证改性材料对于AKK 菌的生物亲和力与，测试了几种微胶囊 中的细菌在黏蛋白液体培养基中的生长能力。 结论：实验数据表明，改性海藻酸钠在喷雾干燥过程中可使微胶囊表面更光滑，更 致密，可以防止损坏，同时EGCG 通过填充微凝胶内部的孔来增强益生菌的抗氧化能 力。在12 天长期储存实验中，掺杂EGCG 喷雾干燥的改性海藻酸钠微囊显示出了更好 的可储存性和稳定性，抗氧化实验表明改性海藻酸钠微胶囊对过氧化氢的抵抗性更强， 在过氧化氢浓度达到2.5 mM 时良好保存了细胞活性，而对于粒径与Zeta 电位的测试 则表明它在液体中有更好的均匀性，有相对高的Zeta 电位绝对值。在胃肠液抵抗性实 验中，改性海藻酸钠微胶囊（掺杂 EGCG ）可以更好地保护胃肠道环境中的益生菌活 性，在经过30 min 的胃肠液浸泡后仍然保持了良好的活力。经过实验结果的分析，喷 雾干燥的EGCG 修饰的藻酸钠微胶囊（含EGCG ）在一系列实验中显示出优异的性能。 在材料亲和实验中，几种不同材料包埋的材料都没有影响细菌的正常生长，证明改性 材料对细菌无害。 综上，本实验制造的掺杂EGCG 的改性海藻酸钠微胶囊，与不经过改性的海藻酸 钠微胶囊相比，大大提高了Akkermansia muciniphila 的保存可能性与对外界不利因素的 抗逆性，从而为生产针对此种新型益生菌的工业化产品提供了行之有效的参考方法。 I 目 录 目 录 摘要I ABSTRACT III 第一章 文献综述 1 1.1 肠道菌群研究背景 1 1.2 Akkermansia muciniphila 以及其益生功能2 1.3 肥胖症3 1.4 肥胖症与糖尿病3 1.5 肥胖症与肠道菌群5 1.6 益生菌封装技术6 1.6.1 封装作用6 1.6.2 封装方法6 1.6.3 封装壁材8 1.7 壁材研究背景8 1.7.1 海藻酸钠研究背景8 1.7.2 有促生与治疗糖尿病与肥胖等作用的天然多糖9 1.7.3 壳聚糖与果胶 10 1.8 影响益生菌活性的不利因素 10 1.9 琥珀酸研究进展 11 1.10 茶多酚研究进展 11 1.11 选题目的与研究