植物体细胞胚胎发生.pptVIP

第十二章 植物体细胞胚 胎发生 ? 第一节 体细胞胚胎发生的方式 ? 第二节 影响体细胞胚胎发生的因素 ? 第三节 体细胞胚胎发生中基因表达与调控 第一节 体细胞胚胎发生的方式 植物体细胞胚（ plant somatic embryos ）：在离体培 养过程中由植物外植体 或愈伤组织产生与受精 卵发育方式类似的胚胎 结构现象。 一、体细胞胚胎发生（ Somatic embryogenesis ）的特点 ** 植物的胚胎发生是从合子开始的。 ** 单细胞悬浮培养、原生质体培养和花粉培养中都观察到体 细胞胚胎发生或花粉胚胎发生（ pollen embryogenesis ） ** 合子发育的胚胎为 二倍体的体细胞产生的胚状结构 ** 体细胞胚胎是 由小孢子或其分裂产物等单倍体细胞产生的 体细胞胚，通常称花粉胚（ pollen embryos ），可发育成单倍 体植株。 花粉培养 单细胞悬浮培养 原生质体培养 组织器官培养 体 细 胞 胚 花 粉 胚 非 合 子 胚 非 合 子 细 胞 合子胚 无融合生殖胚 ** 体细胞胚或花粉胚都是指在植物组织培养中起源于一个非合子细胞， 经过胚胎发生和胚胎发育过程形成的胚状结构 ，包括以下几点含义： 1 、体细胞胚是组织培养的产物，区别于无融合生殖的胚，只限于在组 织培养范围使用； 2 、 体细胞胚起源于非合子细胞，区别于合子胚； 3 、体细胞胚形成经历胚胎发育过程，区别于组织培养的器官发生中芽 与根的分化。 二 体细胞胚发生意义 植物体细胞胚胎发生和诱导器官发生相比 具有明显的特点： 1 具有两极性 2 存在生理隔离 3 遗传性相对稳定 4 重演受精卵形态发生的特性 (A) 伸长期合子； (B) 合子经过第一次分裂 , 产生 1 个顶细胞 ( 绿色 ) 和一个基 细胞 ( 粉红色 ) ； (C) 四分体胚 : 顶细胞经历 2 次纵向分裂，产生含有 4 个细胞 的胚体和 2 个细胞的胚柄； (D) 16 细胞球形胚 : 8 细胞胚的所有细胞经过 1 次 平周分裂 , 产生包含 8 个细胞的表皮原和 8 个细胞的内部组织； (E) 早期心形 胚； (F) 心形胚 : 子叶和胚根原基已经出现； (G) 成熟胚胎。 1: 顶细胞 ; 2 : 基细胞 ; 3: 胚根原细胞 , 形成未来的 ROC 和根冠中央区 ; RM: 根 尖生长点 ; SM: 茎尖生长点 图 6.2 双子叶植物拟南芥的胚胎发育过程 第二节 影响体细胞胚胎发生的因素 1 、基因型与体细胞胚发生 基因型是影响体细胞胚发生的重要因素，体细胞胚的诱导 率和每个胚性外植体上体细胞胚的发生率因基因型而异 （ a ）不同基因型体细胞胚诱导率； （ b ）不同基因型每个胚性外植体上体细胞胚的数目 图 6.7 在相同培养基上 Feijoa sellowiana Berg 不同基因型体细胞胚诱导 （引自 Miguel 等， 2001 ） ? 2 、植物激素与体细胞胚发生 ? ** 离体植物细胞在开始往往缺乏合成生长素和细胞分裂 素的能力，但是在大多数情况下，这些细胞的分裂和分 化以及形态建成过程中又必需生长素和细胞分裂素两种 激素的共同作用。 ? ** 在培养介质中添加不同种类或不同浓度的外源激素诱 导形态发生已受到广泛的重视。 ? ** 但最关键的是组织内部和体细胞胚发生部位的内源激 素代谢动态和平衡。 ? （ 1 ）、内源激素与体细胞胚发生 ? 早在胡萝卜细胞悬浮培养体细胞胚发生中发现， 2 ， 4-D 在诱导胚性细胞早期是必需的，而且 2 ， 4-D 是通过影响 IAA 结合蛋白起作用，其实质是促 进 IAA 结合蛋白的形成，提高细胞对 IAA 的敏感性 从而诱导胚性细胞的形成。 ? （ 2 ）外源激素与体细胞胚发生 ? ① 2 ， 4-D 与体细胞胚发生 ? 2 ， 4-D 是诱导多种植物离体培养体细胞转变为胚性细胞 的重要激素。 ? 单子叶植物和双子叶植物诱导体细胞胚胎发生时，所要求 的 2,4-D 的浓度不同，对单子叶植物而言，一般要求较高 浓度的 2,4-D ，其浓度范围为 0.5-5mg/L ，通常使用浓度 为 2mg/L ； ? 而对双子叶植物而言，一般要求较低浓度的 2,4-D ，其浓 度范围为 0.02-1mg/L ，通常使用的浓度为 0.1mg/L 。 A,C,E 为离体培养 6 周后的体细胞 胚； B,D,F 为离体培养 5 个月后形 成的体细胞胚 A: 品种 GK7 ，在添加 83.0 mM centrophenoxine 培养基上 ; B: 品种 AT120 ，在添加 124.4 mM centrophenoxine 培养基 上 ; C: 品种 59-4