氧化锌纳米颗粒与其老化产物对蒺藜苜蓿及土壤微生物群落的影响.pdfVIP

摘 要 摘 要 伴随纳米技术的快速发展，纳米材料在人类生活生产各领域中的应用需求日益增 长。近年来，纳米材料（大多为金属纳米材料）已经作为肥料、农药等农业制剂逐渐 应用于农业生产中。然而，潜入农业生境中的纳米材料会对植物生长及其微生物群落 产生何种效应，已成为纳米生态环境研究领域中的热点问题。考虑到纳米材料进入土 壤中会发生团聚、老化等环境化学行为，可能会影响其原先颗粒的毒性效应。本研究 拟选取原始态氧化锌纳米颗粒（pZnO NPs ）及其老化产物纳米硫化锌 （sZnO NPs ）为 供试材料，使用豆科模式植物蒺藜苜蓿作为供试植物，采用土壤暴露实验，从生理水 平、亚细胞水平以及分子水平研究pZnO NPs 和sZnO NPs 胁迫下蒺藜苜蓿的响应过程， 结合转录组学比较分析不同锌处理下蒺藜苜蓿基因转录表达谱并从中发掘差异性表达 基因与相关代谢通路；此外，另通过高通量测序技术分析土壤微生物群落的响应变化 趋势，从“植物-微生物”整体出发，多角度阐释pZnO NPs 与其老化产物 sZnO NPs 对蒺藜苜蓿及土壤微生物群落的环境效应。主要研究结果如下： 1. 三种锌处理高浓度暴露 （500 mg·kg-1 ）均显著抑制蒺藜苜蓿的茎伸长与生物量 的积累 （包括鲜生物量和干生物量），而低浓度组（100 mg·kg-1 ）无显著效应。ZnSO4 和pZnO NPs 处理组低、高浓度暴露下均导致蒺藜苜蓿根干生物量及根瘤数量显著减少， 而sZnO NPs 仅在高浓度暴露时出现相似的负面效应。三种锌形式暴露组中茎叶与根部 Zn 累积含量显著高于对照组，且根部的Zn 积累水平显著高于茎叶部分。 2. ZnSO 、pZnO NPs 和sZnO NPs 土壤暴露均引起了蒺藜苜蓿叶片亚细胞结构不 4 同程度的损伤。pZnO NPs 和sZnO NPs 处理组在高、低浓度水平暴露时，均可导致叶 绿体发生膨胀和变形，且高浓度暴露可导致叶绿体内部淀粉粒数量显著增多、体积明 显变大，而ZnSO 处理仅在高浓度暴露水平下发生叶绿体膨胀现象。此外，高浓度ZnSO 4 4 和sZnO NPs 显著降低了蒺藜苜蓿叶片叶绿素a 与叶绿素b 的含量，但pZnO NPs 对叶 绿素含量无显著影响。 3. pZnO NPs 和 sZnO NPs 处理低、高浓度暴露均显著提升土壤可溶性有机碳 （DOC ）的含量。纳米颗粒组 （pZnO NPs 与sZnO NPs ）与锌离子组 （ZnSO ）等三种 4 锌形式暴露胁迫下土壤细菌微生物群落组成与结构表现出各自截然不同的响应特征， 而且相同处理高、低浓度组间也存在显著差异。与细菌群落相比较，真菌群落组成与 结构多样性响应灵敏度不高；与对照组相比较，仅 ZnSO4 处理组真菌结构多样性表现 出显著差异，而pZnO NPs 和sZnO NPs 处理组差异性较小。三种锌形式处理组对于土 I 西北农林科技大学硕士学位论文 壤细菌群落丰度的影响一致，其中土壤变形菌门 （Proteobacteria ）相对丰度相比于对照 组上升约 10%，而蓝细菌门（Cyanobacteria ）相对丰度显著下降。而对于土壤真菌群 落丰度而言，在门水平下，ZnSO4 高低浓度暴露导致子囊菌门 （Ascomycota ）的相对 丰度显著增加（约 30% ），同时接合菌门 （Zygomycota ）与担子菌门 （Basidiomycota ） 的相对丰度显著下降，高低浓度pZnO NPs 处理组的担子菌门 （Basidiomycota ）相对丰 度相比于对照组显著升高，而高低浓度sZnONPs 未对土壤真菌群落丰度造成显著影响。 4. pZnO NPs 与sZnO NPs 处理组转录水平上的基因表达图谱显著差异于对照组和 ZnSO4 处理组，且pZnO NPs 与sZnO NPs 两者之间转录图谱也存在较大的差