第四章nbspN-连接糖基化.pptVIP

* 第4章 N-连接糖基化 第4章 N-连接糖基化 4.1 N-连接糖基化的基本知识 4.1.1 N-连接糖基化的概念： 4.1.2 N-连接糖基化的位点 ： 糖蛋白的N—连接聚糖通过还原端与天冬酰胺的酰胺氮共接连接， 形成了N-连接糖蛋白 Asn-X-Ser/Thr X可以是脯氨酸以外的任何残基 在动物细胞中，与天冬酰胺残基连接的糖，都是N-乙酰氨基葡萄糖 且连接方式总是 β构型 第4章 N-连接糖基化 4.1.3 N-连接糖基化中N-聚糖的分类及特点 特点：有共同的 核心五糖结构 分类：高甘露糖型、复杂型、杂合型 Manα-1，2 Manα-1 2 Manα-1 6 3 Manα-1 6 3 Manα-1，2 Manα-1 Manα-1，2 Manα-1 Manβ-1,4GlcNAcβ-1,4 GlcNAcβ-1-Asn 高甘露糖型: Manα-1 6 3 Manα-1 Neu Acα-2，3Galβ-1,4GlcNAcβ-1 Manβ-1,4GlcNAcβ-1,4 GlcNAcβ-1-Asn 2 4 Neu Acα-2，3Galβ-1,4GlcNAcβ-1 Neu Acα-2，3Galβ-1,4GlcNAcβ-1 2 复杂型: 4 Manα-1 2 6 3 Manα-1 6 3 Manα-1 GlcNAcβ-1 Manβ-1,4GlcNAcβ-1,4 GlcNAcβ-1-Asn Manα-1 GlcNAcβ-1 Galβ-1,4 GlcNAcβ-1,4 杂合型: 第4章 N-连接糖基化 4.1.4 N-连接糖基化在细胞内的定位 及概要途径 1 脂连接前体 寡糖的合成 2寡糖整体转移至 蛋白质 3 寡糖的加工 糖残基初始剪切 分支结构剪切 和修饰 添加末端糖残基 蛋白质 合成 内质网 高尔基体 质膜 分泌或输送 至质膜 粗面内质网 和高尔基体 定位： 概要途径： 第4章 N-连接糖基化 UDP-GlcNAc 多萜醇-P GDP-Man 多萜醇-P Man 多萜醇-P Glc 蛋白质接纳体 GDP-Man 多萜醇-P Man UDP-Glc 多萜醇-P Glc 内质网内腔 细胞质 细胞质 多萜醇 Man Glc GlcAc P 多萜醇 葡萄糖 4.2.1 脂连接前体寡糖的合成 4.2 N—连接糖基化的具体过程 第4章 N-连接糖基化 启动N-连接聚糖合成的供体似一种Gla3Man9GlcNAc2结构，通过焦磷酸连键与脂质多萜醇结合。多萜醇一螺旋或折叠式构象插入脂双分子层中。多萜醇头部基团上的聚糖的组装分两阶段进行。第一阶段发生在内质网膜的细胞质侧面，第二阶段发生在腔内。催化两个GlcNAc残基和五个甘露糖残基结合所需的酶，直接利用了核苷酸供体尿苷二磷酸UDP-GlcNAc和GDP-Man。此时，脂连接的聚糖进行跨膜易位。增长的聚糖链暴露在内质网膜的腔内侧，新糖继续添加，作为添加最后4个甘露糖残基和3个葡萄糖残基的中间供体是连接多萜醇的糖。与多萜醇连接的这两种糖，是由多萜醇磷酸与UDP-Glc或GDP-Man反应，在内质网膜的细胞质表面上合成的。在这些反应中能量来自糖-磷酸键 1 脂连接前体 寡糖的合成 2寡糖整体转移至 蛋白质 3 寡糖的加工 糖残基初始剪切 分支结构剪切 和修饰 添加末端糖残基 蛋白质 合成 内质网 高尔基体 质膜 分泌或输送 至质膜 第4章 N-连接糖基化 4.2.2 寡糖整体转移至蛋白质 第4章 N-连接糖基化 核糖体 细胞质 寡糖基转移酶 内质网腔面 信号序列 多萜醇 P GlcNAc Glc Man Asn-X-Ser/Thr 第4章 N-连接糖基化 与聚糖连接的天冬酰胺残基必须满足以下三个条件： （1）在蛋白质一级结构内，天冬酰胺残基必须位于特异序列 （2）在蛋白质三维结构内它们必须处于合适的位置 （3）它们必须出现在正确的膜内区室 第4章 N-连接糖基化 核糖体 细胞质 寡糖基转移酶 内质网腔面 信号序列 多萜醇 P GlcNAc Glc Man Asn-X-Ser/Thr 第4章 N-连接糖基化 寡糖基转移酶：OST都是有1-8个跨膜结构域膜蛋白。OST复合物结合脂连接的寡糖，再通过切断GlcNAc-P的高能键，将GlcNAc转移到新生翻译的蛋白质上，此过程中，释放Dol-P-P。 第4章 N-连接糖基化 蛋白质的折叠控制： 第4章 N-连接糖基化 1 脂连接前体 寡糖的合成 2寡糖整体转移至 蛋白质 3 寡糖的加工 糖残基初始剪切 分支结构剪切 和修饰 添加末端糖残基 蛋白质 合成 内质网 高尔基体 质膜 分泌或输送 至质膜 4.2.3 寡糖的加工 第4章