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- 2021-02-01 发布于天津
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DNA 和蛋白质技术 考点一 DNA 的粗提取与鉴定 1. 基本原理 提取原理 DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度随浓度的变化 而改变, DNA 在 0.14mol / L 的 NaCl 溶液中溶 解度最低。 提纯原理 ( 对酶、高温和洗涤剂的耐受性及在 酒精中的溶解度不同) ① 酶的专一性——蛋白酶水解蛋白质而对会对 DNA 不产生影响。(加柔嫩粉) ② 蛋白质、 DNA 热稳定性不同。温度值为 60 ~ 80℃,因为该温度值蛋白质 变性 沉淀,而 DNA 不 会变性。 ③ 洗涤剂瓦解 细胞膜 ,对 DNA 没有影响。 ( 3 ) DNA 鉴定原理 在 沸水浴 条件下, DNA 遇二苯胺呈现 蓝色 ? ( 1) 材料的选取:选用 DNA 含量相对 的生物组织,如 非哺乳动物的红细胞(鸡血)、菜花、洋葱等。 ? ( 2 )材料处理:鸡血(吸水胀破法),植物细胞(洗涤 剂和食盐。食盐的作用是溶解 DNA ,洗涤剂的作用的溶解 细胞膜) 提取血细胞核物质 ( 蒸馏水涨破)→溶解 (2 mol/L 的 NaCl 溶液)→过滤 ( 除杂质)→析出 ( 滴蒸馏水, 降 NaCl 溶液浓度至0.14 mol/L)→过滤→再溶解 (2 mol/L 的 NaCl 溶液)→过滤→进一
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