气相色谱操作技术 .pptVIP

三、气相色谱柱 在James和Martin的开创性工作中，他们使用了4mm内径的1.2～3.3m长的柱子，内填均匀涂布固定液的惰性多孔颗粒(担体)。从那时开始，填充柱开始得到应用。至1958年，16m×2.2mm的填充柱，最佳化后柱效可达30000理论板数。通过引入更惰性的单体和减少涂渍量，填充柱的应用范围可扩展到类固醇等重要生物化合物的分析。 柱效的进一步突破是Golay引入的毛细管柱，可取得几十万甚至上百万的理论板数。 柱技术中的另一个重要进展是载体涂渍型开管柱(SCOT)的开发，样品容量得到了进一步的增加。同时，柔性石英柱和固定相交联技术的引入使得气相色谱柱技术日益成熟，使之成为当今广泛使用的分辨率最高的一种技术。 对特定样品分析的最佳柱系统要遵循下列三个原则： ①溶质有合适的保留值范围 (0.2≤k≤20)； ②满意的分离度； ③分析时间最短。 (一)填充柱 用作填充柱的管材通常是内径均匀的玻璃管、金属管和塑料管。* 柱管尺寸一般为2～4mm，长度0.5～3m，U形或螺旋形，填充0.2～0.4mm颗粒。 (1)玻璃柱 玻璃柱的材质一般用硬质玻璃。 优点是制备的柱子柱效高，观察柱子填充情况方便，化学惰性好； 缺点是易碎。 洗涤方法为先用洗液浸泡，后用水冲洗干净。 在分析不稳定物质时，应用HCl除去表面的金属离子，水洗到中性后，再用甲醇洗并干燥。必要时还可采用5％二甲基二氯硅烷处理，然后用无水甲苯、甲醇冲洗，并干燥。 清洁玻璃柱表面的另一个方法是用浓硝酸在90℃加热4h，冷却后用蒸馏水冲洗；再用浓氨水在室温下处理lh，水洗后再用冰醋酸室温下处理1h，最后用蒸馏水洗净。氨处理导致了一个激活的多孔表面，适合于硅烷化。乙酸消除了表面的金属氧化物。表面的活性位可用20％C18。三烷氧基硅烷阻断。 (2)金属管柱 金属管柱的材质多采用不锈钢。铜柱与乙炔要起反应，应予注意。 不锈钢柱的洗涤方法:将内壁用布条擦净,先用10％热NaOH水溶液浸泡，然后用水洗到中性。 也可用乙酸乙酯、甲醇、蒸馏水洗，然后用10％硝酸充填10min，用水洗到中性后，再用甲醇、丙酮洗，最后在氮气流中吹干。 由于不锈钢中过渡金属的存在，类固醇或农药或许会发生分解。 镍柱如果与不锈钢柱一样处理，几乎与玻璃柱一样惰性，类固醇、生物碱、巴比妥、儿茶酚胺等均可在此柱分析。 (3)塑料管 用聚四氟乙烯管可分析强腐蚀性物质如HCl、C12、HF和ClF3。 此柱的缺点是柱效低。 (二)微填充柱 由于在样品容量、相比、单位时间的分辨率等方面的优越性，微填充柱的重要性不断增强。 此种柱子具0.3～lmm的内径，1～15m的柱长，填充0.007～0.3mm的颗粒。如果粒径与柱内径之比≈0.25，则柱子可有序、致密地填充；＞0.25时，填充变得无序、致密性较差。 表7 填充柱的分类和特征 由于微填充柱的高效和足够的样品容量，因此用它分析多组分混合物非常好，较适合于痕量分析，尤其适于与质谱联用和快速分析。 不足之处是柱压降较大，从0.03MPa到0.3MPa不等，取决于颗粒大小、填充密度及柱长。但由于其较高的柱效和较低的Cg项，使得较短的微填充柱也可产生较高的理论板数(如5000—10000板数／m)，同时使用较高的载气线速而不至于严重的损失柱效，两者均有利于高速分析。 (三)开管柱 Golay首先报道了柱内不含填料的开管柱，固定液只涂渍在毛细管柱的内表面(WCOT柱)。 毛细管气相色谱柱常用的管材是熔融石英和不锈钢。玻璃柱由于易碎，现已很少使用。石英柱柔性好，已越来越多地在毛细管柱中使用。缺点是外壁的聚酰亚胺不能耐高温(＜340℃)，且不同批次的柱子性能不够稳定。 不锈钢毛细管柱一般5～100m，外径1.0～1.6mm[最常用1．59mm(1/16in)]，内径0.05～1.15mm[最常用的为0.2—0.3mm (WCOT柱)或0.2～0.5mm(SCOT柱)]。 柱内径应该均匀，否则会影响柱效和相比。 玻璃和石英柱类似于不锈钢柱。0.10～0.2mm适合于高分辨分析(仅分流进样)和质量型检测器。 表8 不同柱型的特征比较 (四)评价气相色谱柱的性能指标 (1)塔板数 (3)分离数(TZ) 分离数表示同系物中碳数相邻的两个色谱峰间能插入满足分离度要求的色谱峰的数目。 (4)涂渍效率(