柞木防治尿路结石机理的初步研究.pptxVIP

柞木防治尿路结石机理的初步研究 前言 试验方法和材料 动物实验 高血尿酸模型 通过“酵母膏+乙胺丁醇”连续灌胃3周 健康成年实验Wister大鼠 实验动物 动物实验 正常组：不给任何药物； 模型空白组：酵母膏+乙胺丁醇； 模型+柞木高剂量组：酵母膏+乙胺丁醇+高剂量 柞木； 模型+柞木中剂量组：酵母膏+乙胺丁醇+中剂量 柞木； 模型+柞木低剂量组：酵母膏+乙胺丁醇+低剂量 柞木；模型+别嘌呤醇对照组：酵母膏+乙胺丁醇+别嘌呤醇。 正常组和模型组大鼠同等条件下均正常喂养。 实验分组与给药 动物实验 灌胃乙胺丁醇 灌胃酵母膏 灌胃柞木 灌胃别嘌呤醇 动物实验 称取 柞木100g，置入大烧杯中，加去离子水浸泡5h后，煎熬2次，每次1.5h，保留提取液约300ml，每毫升滤液相当于0.3g生药。用于动物实验灌胃。 体外模拟实验：需将提取液离心，弃去沉渣，按提取液体积的20%加入壳聚糖凝絮剂以除去溶液中的粗粒子，磁力搅拌0.5h，放置过夜，离心，弃去沉渣，上层清液用0.45um的微孔滤膜过滤，滤液置冰箱中备用。 柞木大鼠等效剂量：6.4（折算系数）x30g/60kg＝3.2g/kg 柞木提取液 动物实验 1）酵母膏15g/kg/d：称量酵母膏60g，加入20ml蒸馏水，配成浓度为1.5g/ml的酵母膏溶液。 2）乙胺丁醇0.125g/kg/d：将2粒盐酸乙胺丁醇胶囊溶于40ml蒸馏水中，配成0.0125g/ml的乙胺丁醇溶液。 3） 柞木高剂量6.4g/kg/d。 4） 柞木中剂量3.2g/kg/d。 5） 柞木低剂量1.6g/kg/d。 6）别嘌醇片75mg/kg/d：将3片别嘌醇片溶于20ml蒸馏水中配成15mg/ml溶液。 试剂配制 动物实验 ①血液：所有大鼠3周后处死，立即从大鼠髂血管抽取血液5ml，37℃水浴30min，2000-2500r/min离心15min，血清分装后-20℃保存待检，用于检测血尿酸和血清肌酐和尿素氮。 ②尿液：实验结束前用代谢笼收集24小时尿量，用于检测尿尿酸。 ③大鼠双肾标本：大鼠处死后，切除大鼠双肾，10%中性福尔马林固定，用于常规HE石蜡切片，观察肾组织的病理改变。 标本采集及指标检测 动物实验 大鼠尿液 收集尿液 采血 大鼠肾脏 体外模拟实验 柞木能否络合钙的体外实验。 实验分为二组： 一组为柞木提取液+氯化钙+去离子水； 另一组为枸橼酸纳溶液+氯化钙+去离子水。 每一组溶液总量为2ml，氯化钙为0.2ml。 实验方案 体外模拟实验 表1： 柞木煎剂+氯化钙+去离子水 编号 1 2 3 4 5 6 氯化钙（ml） 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 柞木提取液0.1 0.2 0.4 0.8 1.6 0 去离子水 1.7 1.6 1.4 1.0 0.2 1.8 表2：枸橼酸纳溶液+氯化钙+去离子水 编号 1 2 3 4 5 6 氯化钙（ml） 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 枸橼酸纳溶液 0.1 0.2 0.4 0.8 1.6 0 去离子水 1.7 1.6 1.4 1.0 0.2 1.8 实验方案 试验结果与分析 各组大鼠尿液中尿酸的测定 与对照组相比，*P 0.05;与模型组相比，#P 0.05 试验结果与分析 各组雄性大鼠血液中尿酸含量、尿素氮及肌酐含量的测定 与对照组相比，*P 0.05;与模型组相比，#P 0.05 试验结果与分析 各组雌性大鼠血液中尿酸含量、尿素氮及肌酐含量的测定 与对照组相比，*P 0.05;与模型组相比，#P 0.05 试验结果与分析 各组大鼠24 h尿量的测定 与对照组相比，*P 0.05;与模型组相比，#P 0.05 试验结果与分析 各组大鼠血液中钙含量的测定 与对照组相比，*P 0.05;与模型组相比，#P 0.05 试验结果与分析 各组大鼠HE染色结果（×400） 正常对照组