细胞生物学课件第八章 细胞核.docVIP

PAGE PAGE 1 第八章 细胞核(nucleus)与染色体(chromosome) ●细胞核是真核细胞内最大、最重要的细胞器（见），是细胞遗传与代谢的调控信息中心 第一节 细胞核的结构 一、核被膜（nuclear envolope） 1、结构组成 （1）外核膜（outer nuclear membrane），附有核糖体颗粒 （2）内核膜（inner nuclear membrane），有特有的蛋白成份（如核纤层蛋白B亚基） （3）核纤层（nuclear lamina），属骨架蛋白，在去垢剂、核酸酶和高盐处理后，去除核的其他成分后所剩部分 （4）核周间隙（perinuclear space） （5）核孔（nuclear pore） 2、核被膜的功能 （1）构成核、质之间的选择性屏障,避免生命活动的彼此干扰，保护DNA不受其他机械力或化学的损伤 （2）利于核质之间的物质交换与信息交流 （3）在细胞有丝分裂中有规律的解体与重建 细胞分裂时，核膜解体为膜泡或“环状片层”，细胞分裂结束时核膜重现，变形虫3H－胆碱标记平均分配到子细胞核被膜中，表明新核膜来自与旧核膜 b、非洲爪蟾卵提取物的装配体系提供模型证明直径为200nm单层小泡是核膜重建材料 c、解体与重建受细胞周期调控因子的调节 调节作用可能与核纤层蛋白、核孔复合体蛋白的磷酸化与去磷酸化修饰有关。 二、核孔复合体（nuclear pore complex,NPC） 1、结构模型 （1）胞质环（cytoplasmic ring），外环 （2）核质环（nuclear ring），内环 （3）辐（spoke） a、柱状亚单位（column subunit） b、腔内亚单位(luminal subunit) c、环带亚单位（annular subunit） （4）中央栓（central plug）：transporter 2、核孔复合体成份的研究 核孔复合体主要由蛋白质构成，其总相对分子质量约为125×106，由100余种不同的多肽，共约1 000多个蛋白质分子。 比较清楚的几种蛋白是 （1）gp210：结构性跨膜蛋白 a、介导核孔复合体与核被膜的连接，为核孔复合体装配提供一个起始位点。 b、在内、外核膜融合形成核孔中起重要作用 c、在核孔复合体的核质交换功能活动中起一定作用 （2）p62：功能性的核孔复合体蛋白，具有两个功能结构域 a、疏水性N端区：可能在核孔复合体功能活动中直接参与核质交换 b、C端区：与复合体蛋白相互作用，从而将p62分子稳定到核孔复合体上，为其N端进行核质交换活动提供支持。 3、核孔复合体的功能 （1）核质交换的双向性亲水通道 核孔复合体物质运输功能示意图 （见） 爪蟾卵母细胞核质蛋白注射实验 （见） （2）通过核孔复合体的主动运输 生物大分子的核质分配主要是通过核孔复合体的主动运输完成的，具有3个选择性双向的运输： 特点： a、对运输颗粒大小的限制：有效功能直径可被调节约10～20nm，甚至可达26nm， b、主动运输是一个信号识别与载体介导的过程，需要消耗能量 c、双向性，即核输入与核输出 （3）对核定位信号（NLS）的研究 a、核质蛋白（nucleoplasmin）：对爪蟾分析表明NLS是MW为165×103的五聚体蛋白 对SV40的T抗原分析表明：NLS在尾部，SV40 T抗原为TAA序列：即Pro－Lys－Lys－Lys－Arg－Lys－Val 结合转移二步法：有NLS和GTP能量参与 5’端m7GpppG是mRNA出现条件 NLS序列可存在于亲核蛋白的不同部位，在指导完成核输入后并不被切除 蛋白从质到核的输入过程见教材257页图 (4)转录产物RNA的核输出 转录后的RNA通常需加工、修饰成为成熟的RNA分子后才能被转运出核。 a、rRNA分子是由RNA聚合酶I转录的：以RNP的形式离开细胞核，需要能量； b、mRNA的前身hnRNA是由RNA聚合酶III转录得到的，在核内进行5’加帽和3’加多聚腺嘌呤核苷酸（poly A）以及剪切加工后成为mRNA,5’端的帽m7GpppG对mRNA出核是必要的； c、tRNA和5SRNA是由正负调控信号控制，负信号是防止hnRNA输出，和剪切体有关； d、mRNA的出核转运过程是有极性的，其5’端在前，3’端在后。 e、核输出信号 (Nuclear Export Signal，NES)是一种蛋白因子，含有出核信号。 f、入核转运与出核转运之间有某种联系，它们可能需要某些共同的因子。 第二节 染 色 质 （Chromatin） 一、染色质的概念及化学组成 1、染色质概念 （1）染色质（chromatin）: 指间期细胞核内由DNA、组蛋白、非组蛋白及