细胞通透性实验报告总结计划.docxVIP

. 山东大学实验报告 2019年 3 月 14日 姓名 系年级 17 级 学号 同组者 科目 细胞实验 实验题目 观察细胞的通透性 仪器编号 一、 实验目的 了解溶血现象及细胞通透性的一般规律； 观察细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度； 二、 实验原理 细胞膜是一种半透膜 ,对物质的通透具有选择性，使细胞具有一个相对稳定 的内环境。将红细胞放在低渗溶液中，水分子会大量渗到细胞内，使细胞胀破 , 血红蛋白释放到介质中， 发生溶血。将红细胞放入含有不同溶质的溶液中， 由于细胞膜对各种溶质的透性不同， 有的溶质可以渗入， 有的则不能， 渗入的溶质能提高红细胞的渗透压， 所以促使水分进入细胞。 由不透明的红细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶液，这种现象称为溶血 ( hemolysis )。随着水分不断进入，红细胞最终破裂并引起溶血。 因而发生溶血现象所需的时间长短可以作为测量物质进入红细胞速度的一种指标。 因此，本实验选用红细胞作为细胞膜透性的实验材料， 将其放人不同的介质溶液中，观察红细胞的变化。 三、 实验用品 实验材料 鸡血（事先取好，加入 Alsever 液，混匀后制悬液， 4℃保存）； 实验试剂 0.85%的氯化钠溶液（等渗溶液） ； 0.0085%的氯化钠溶液（低渗溶液） 0.8mol/L 的甲醇、0.8mol/L 的丙三醇、6%的葡萄糖溶液、2%的 Triton X-100 溶液（高渗溶液）； 实验器材 试管（此处用的是刻度离心管）六支、离心机、滴管、载玻片、盖玻片、显微镜等 四、 实验步骤 取血 吸取预先处理好的鸡血溶液 6mL，加入 4mL 的等渗 0.85%的氯化钠溶液，混匀后放入离心机， 1200rpm 离心 5min； . . 山东大学实验报告 2019年 3 月 14日 姓名 系年级 17 级 学号 同组者 科目 细胞实验 实验题目 观察细胞的通透性 仪器编号 制细胞悬液 用滴管吸取上清液，加入与沉淀量相等的等渗 NaCl溶液，混匀制成悬液。（如果沉淀量少于 1.2ml，则补充鸡血） 溶血现象观察 在离心管之中分别加入 0.85%的氯化钠溶液、 0.0085%的氯化钠溶液、 0.8mol/L 的甲醇、0.8mol/L 的丙三醇、6%的葡萄糖溶液、2%的 Triton X-100 溶液 3mL，滴入两滴细胞悬液，立即混匀并计时，溶血现象发生后，记录溶血时间，并制片观察溶血情况： 0.0085%的氯化钠溶液、 0.8mol/L 的甲醇、 2%的 Triton X-100溶液（高渗溶液）反应非常迅速，因此需立即观察； 0.8mol/L 的丙三醇、 6%的葡萄糖溶液反应程度不剧烈，所以，每间隔 10 分钟观察记录溶血情况，观察 1h。 注意： 6%的葡萄糖溶液有强烈的诱导细胞融合的作用，因此，必须严格混匀之后进行观察。 五、 实验结果判断 (一 ) 判断指标 不溶血 :液体分二层，上层浅黄色透明，下层红色不透明。镜检红细胞完好。 不完全溶血 :溶液混浊，上层变成红色，镜检有部分红细胞有缺口或破裂。 (3)完全溶血 : 液体变红而且透明，镜检发现细胞全部成碎片。 (二 ) 记录溶血时间 : 试剂类型 是否溶血 时间 结果分析 0.85%NaCl+稀释鸡血 否 等渗溶液中不会发生破裂，作 为对照。 0.0085% NaCl+稀释鸡血 是 30s 低渗溶液，细胞吸水涨破。 0.8mol/L 甲醇 +稀释鸡血 是 8s 高渗溶液，细胞通透性大，导 致胞内渗透压升高， 吸水涨破。 0.8mol/L 丙三醇 +稀释鸡血 是 9s 高渗溶液，细胞通透性大，导 致胞内渗透压升高， 吸水涨破。 . . 山东大学实验报告 2019年 3 月 14日 姓名 系年级 17 级 学号 同组者 科目 细胞实验 实验题目 观察细胞的通透性 仪器编号 6%葡萄糖溶液 +稀释鸡血 是 1h 内未完 高渗溶液，细胞吸收缓慢，细 全溶血 胞逐渐吸水涨破。 2%Triton X-100 溶液 +稀释鸡 是 1h 内未完 高渗溶液，细胞吸收缓慢，细 血 全溶血 胞逐渐吸水涨破。 六、 实验结果照片 0.85% NaCl 溶液（对照组） 图 1 0.85% NaCl 溶液下的细胞形态（放大倍数 10 ×40 ）： 细胞轮廓明显清晰，细胞大小正常，细胞质透光正常。 2. 0.0085% NaCl溶液 图 2 加入后 30s，细胞悬液出现溶血现象： 图 3 加 0.0085%NaCl 溶液后的细胞形 . 由深红色 态（ 10×40）：溶血后，细胞破裂，留下 （右为等渗对照，左为实验组） 溶液变为，透明、颜色较浅的溶液。 一个模糊的血影（较暗视野观察） 。 . 山东大学实验报告 2019年 3 月 14日 姓名 系年级 17 级 学号 同