外植体选取与低温处理对花椰菜不育系诱导培养的影响.docVIP

外植体选取与低温处理对花椰菜不育系诱导培养的影响?农 学论文 外植体选取与低温处理对花椰菜不育系诱导培养的影响 刘庆1,2 ,朱世杨1,2 ,张小玲1,2 ,朱婷婷2 ,罗天宽1,2 (1温州市农业科学硏究院,浙江温州325006 ; 2温州科技职业学院， 浙江温州325006 )摘要:为给’瓯雪60天 制种母本9901A (隐性核不育系) 的快速繁殖提供依据，研究了花椰菜花球采收期、20 cm抽薑期、开花期不同 部位取材外植体对诱导培养的影响。结果表明：不同生育阶段不同部位取材外植 体的愈伤组织诱导率均为100%。不同阶段不同部位外植体诱导出芽效果存在差 异,以开花期花托诱导岀芽数量最多,采收期3 mm厚花枝诱导岀芽数量次之, 20 cm抽蔓期则诱导不出芽。4弋低温处理1天采收期花球表面花枝的诱导效果 较好，而低温处理3、7天的诱导效果有所降低。 关键词 ：夕卜植体选取；低温处理；花椰菜不育系；诱导培养 中图分类号：S635.3文献标志码:A论文编号：2014-0205 基金项目:温州市科技计划项目〃瓯雪60天花椰菜制种技术研究及开 发利用(「松花型花椰菜种质资源创新与新品种选育研 究(o 第一作者简介：刘庆,男,1979年岀生,浙江苍南人，助研，本科, 主要从事花椰菜育种硏究。通信地址:325006温州市六虹桥路1000号温州 市农业科学硏究院,Tel : 0577; E-mail :.como 通讯作者：朱世杨，男，1982年岀生z江苏如皋人，讲师，硕士，主 要从事花椰菜育种与植物生理硏究。通信地址：325006温州市六虹桥路1000 号温州市农业科学硏究院 / Tel : 0577z E-mail : ［emailprotected］o 收稿日期:2014-03-10 z修回日期:201牛07-05。 0引言 1瓯雪60天是温州市农业科学硏究院利用花椰菜隐性细胞核雄性不 育系9901A为母本，优良自交系9908为父本，培育而成的花椰菜杂交组合。 该组合于2009年12月通过浙江省非主要农作物品种审定委员会审定，审定编 号为浙（非）审该组合已在浙江温州、四川成都等地方大面积推 广应用。由于’瓯雪60天 制种母本9901A系隐性细胞核雄性不育系z不易 通过种子繁殖母本进行制种,限制了其大规模的推广应用。应用植物组织培养技 术可以繁殖保持花椰菜的优良特性。前人已经开展了一些花椰菜组织培养方面硏 究。如吴丽芳等［1］以花球为外植体研究了花椰菜不育系组培快繁和无糖生产技 术；张小玲等［2］以未受精子房、花托、花序轴为外植体进行了花椰菜离体培养 诱导成苗研究；黄俊轩等［引以花椰菜叶片为外植体硏究了其离体再生技术；许 端祥等⑷则以腋芽为材料开展了花椰菜自交不亲和系的组培快繁研究。然而, 关于花椰菜隐性细胞核雄性不育系不同生育阶段不同部位外植体诱导培养的硏 究尚未见报道。为此，笔者以’瓯雪60天 核不育系母本9901A为材料，开 展不同生育阶段不同部位取材外植体对诱导培养影响的研究，以为’瓯雪60天 制种母本快速繁殖提供参考。 1材料与方法 1.1试验设计 1.1.1夕卜植体选取处理以’瓯雪60天母本9901A花球采收期（2010 年12月30 B X 20 cm抽薑期（2011年1月21日）、开花期（2011年3月 10 B )3个生育阶段不同部位外植体为接种材料，设置处理:(1)采收期花球 表面3 mm厚花枝;(2)20cm抽篁期由上端往下数的顶端以及第一、二 三 分枝(图1左)；(3)开花期由顶端往下数的花托、花柄以及第一、二分枝(图 1右L 图1抽■期和开花期外植休选取部位示意 1.1.2夕卜植体低温处理以’瓯雪60天 母本9901A采收期花球表面3 mm厚花枝为接种材料，于4弋冰箱中分别低温处理0、1、3、7天，然后供接 种用。 1.2诱导培养 1.2.1诱导培养基配方所用培养基为MS+2,4?D0.01mg/L+BA 1 mg/L +NAA 0.001 mg/L ,蔗糖浓度为 3.0% ,琼脂浓度为 0.7% , pH 5 1.2.2无菌接种诱导培养取上述外植体无菌接种，然后置于培养室(温 度24±2°C海天光照12 h ,黑暗12 h )中诱导培养。接种时将外植体切成2~3 mm ,每瓶接种5小块,每处理接种30瓶。50天后，随机挑选4瓶，统计 愈伤组织诱导率和诱导芽数。 愈伤组织诱导率=(带有愈伤组织外植体数/接种外植体数)x 100% ; 诱导芽数二诱导出的芽数/接种外植体数。 1.3数据分析 数据用Excel分析软件进行统计和分析。 2结果与分析 2.1夕卜植体选取时期和部位对花椰菜诱导培养的影