人类疾病的分子基础第四次基因分析iia-hxj2015q.pdfVIP

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2021-01-31 发布于北京
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基因分析II 高通量核酸分析技术（基因芯片、第二代测序技术）蛋白分析技术蛋白与核酸相互作用分析技术北京大学人民医院何湘君让我们带着问题来学习 • 表达谱芯片结果为什么需要实时定量PCR验证？ • 二代测序技术为什么可以分析表达谱变化？ • 免疫组化与Western Blotting在敏感性方面有什么不同？生命科学发展的新特征 1. 对高新技术的需求和依赖越来越强 2. 以基因组学为代表的组学研究引领生命科学的发展高通量核酸分析技术不断改进、其应用日益增多，了解其原理有助于正确选择产品，正确解释结果。基因芯片检测原理 • 将千万个不同的核酸分子探针按照预定位置固定在固相载体上很小面积内，组成微阵阵列。把样品中的核酸片段进行标记，在一定条件下，与载体上的核酸分子杂交，通过芯片阅读仪检测杂交信号。是一种反向杂交。 • Gene Chip，DNA Chip，DNA Micorarray 单通道芯片检测两个样品分别在两张芯片上进行杂交双通道芯片检测两个样品在同一张芯片上进行杂交表达谱芯片采用cDNA或寡核苷酸片段作探针，固化在芯片上；将待测样品（处理组）与对照样品的mRNA以两种不同的荧光分子进行标记，然后同时与芯片进行杂交，通过分析两种样品与探针杂交的荧光强度的比值，来检测基因表达水平的变化。应用 • 比较正常人不同组织细胞中特定基因的表达差异 • 比较正常组织与病变组