细胞生物学 6细胞骨架.ppt

3 ．细胞内运输 细胞内有些物质的定向运送，特别是膜 泡运输， 与微管的存在有关。 如：细胞的分泌颗粒和色素细胞的色素 颗粒的运输。 4 ．细胞运动 纤毛和鞭毛是细胞的运动细胞器， 其主要的构成成分即为微管。 有些细胞是靠变形进行移动， 其细胞质的运动变化与微管的导向有关。 5 ．纺锤体与染色体运动 第二节 微 丝 直径为 6-7nm ，长度不定， 由肌动蛋白组成，故又名肌动蛋白丝。 普遍存在于各种真核细胞中， 分布：质膜下方的外质中、 细胞与细胞之间、 细胞与固体间质相接触的部位。 紧临质膜下方的微丝平行排列成束，这种微丝束 即所谓的应力纤维 (stress fiber) 。 （一）微丝的组成 主要蛋白质成分：肌动蛋白 (actin) 大小为 43kDa ，外观呈哑铃形。 哺乳动物和鸟类： 6 种肌动蛋白 4 种：α肌动蛋白， 横纹肌、心肌、血管平滑肌和肠道平滑肌特有； 2 种：β肌动蛋白和γ肌动蛋白：普遍存在 （二 ) 微丝的装配 纯化单体： G- 肌动蛋白，外观哑铃形、 有极性、头尾相接 肌动蛋白丝： F- 肌动蛋白构成、右手螺旋 有极性、动态结构 装配有：“ + ” 极、 “ - ” 极 也形成踏车现象 （三）微丝结合蛋白 三类： 1. 横连蛋白： 两个和多个肌动蛋白结合位点， 同时结合多条肌动蛋白丝， 将多条肌动蛋白丝横连成束。 2. 戴帽蛋白 (capping protein) 3. 单体稳定蛋白 (monomer stablizing protein) （四 ) 微丝的特异性药物 主要有细胞松弛素和鬼笔环肽等 1. 细胞松弛素 特异性地破坏微丝。 2 ．鬼笔环肽 抑制微丝的解聚从而稳定微丝。 （五）微丝的功能 细胞质膜下方一层特殊的细胞质，称为外质。 外质中含有大量的肌动蛋白丝 这些微丝与质膜平行排列形成网络状结构并与质 膜相连， 这层特殊的细胞质为胞质凝胶层，使质膜具有一 定的强度和韧度，对于驱动胞质环流、维持细 胞外形和细胞运动均具有重要意义。 1. 维持细胞外形 2. 变形运动 许多动物细胞在进行位置移动时 多采用变形运动 如：原生动物的变形虫、 高等动物的巨噬细胞和白细胞 以及器官发生时的胚胎细胞等 这些细胞的静止外质中含有丰富的微丝， 细胞的变形运动与外质中 F 肌动蛋白的凝胶和溶 胶状态之间的相互转变有关。 R. Allen 提出了变形运动的前端收缩学说： 细胞骨架 ? Koltzoff(1928) 提出了细胞骨架的原始概念，是 设想。 ? 1960 年左右，戊二醛作电镜固定剂（以前用锇 酸和高锰酸钾作固定剂，不利于细胞骨架保存）， 首次在水螅刺细胞中观察到微管。 细胞骨架是几种蛋白性纤维状成分形成的骨架样 结构，在真核细胞中广泛存在。 细胞骨架广义分类 细胞骨架狭义分类 即细胞质骨架 细胞骨架： 真核细胞中由蛋白纤维组成的网架结构， 由微管、微丝和中间纤维组成。 利用常规方法，普通光镜下看不到， 利用免疫荧光方法可显示微管和微丝在细 胞中的分布 第一节 微 管 一、微管的形态结构 细长而具有一定刚性 圆管状结构 广泛存在于各种真核细胞中 在细胞内多呈网状或束状分布 与维持细胞形态、细胞运动及细胞分裂有关 微管： 中空，长度不等 内径： 15nm ，外径 24-26nm ，壁厚 5nm 二、微管的化学组成 （一）微管蛋白 (tubulin) 主要成分 占总蛋白质 80 ％ -95 ％ 微管蛋白两种 : α、β微管蛋白 二者组成异二聚体 异二聚体是构成微管的基本亚单位 若干异二聚体首尾相接，形成了原丝 微管由 13 根原丝排列而成，大小上均匀一致 微管存在形式： 单管 二联管 ( 纤毛和鞭毛 ) 三联管 ( 中心粒和基体 ) α微管蛋白与β微管蛋白 化学性质相似， 相对分子质量均为 50kDa ， 氨基酸分别为 450 个和 445 个 氨基酸序列分析表明： 二者有 42 ％的顺序相同 第 142-148 残基均为一甘氨酸群， 为磷酸基或 GTP 的结合部位； 在 -C00H 端均为一肌钙蛋白 T 顺序 各种生物的微管蛋白几乎完全相同，说明： α和β微管蛋白具有同一个基因祖先， 而且在进化过程中极为保守 微管蛋白异二聚体上含有： 鸟嘌呤核苷酸的 2 个结合位点 二价阳离子的结合位点 一个长春花碱的结合位点 微管蛋白肽链中的第 201 位的半胱氨酸 为秋水仙素分子的结合部位 （二）微管结合蛋白 (MAP) 2 种高相对分子质量的 MAP 即 MAP-1(345kDa) 和 MAP-2(271-286kDa) ； 2 种低分子量的 MAP(28kDa ， 30kDa) tau 蛋白： 5 种，大小在 55 ～ 77kDa 之间 MAP 和 tau 蛋白 : 在微管蛋白装配成微管之后， 结合在微管表面的辅助