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目 录 第四节 蛋白质的理化性质与分离纯化 The Physical and Chemical Characters and Separation and Purification of Protein 目 录 (一)蛋白质的两性电离 一、理化性质 蛋白质分子除两端的氨基和羧基可解离外, 氨基酸残基侧链中某些基团,在一定的溶液 pH 条 件下都可解离成带负电荷或正电荷的基团。 * 蛋白质的等电点 ( isoelectric point, pI) 当蛋白质溶液处于某一 pH 时,蛋白质解离成 正、负离子的趋势相等,即成为兼性离子,净电 荷为零,此时溶液的 pH 称为 蛋白质的等电点。 目 录 (二)蛋白质的胶体性质 蛋白质属于生物大分子之一,分子量可自 1 万 至 100 万 之 巨 , 其 分 子 的 直 径 可 达 1 ~ 100nm ,为胶粒范围之内。 * 蛋白质胶体稳定的因素 颗粒表面电荷 水化膜 目 录 定义 蛋白质的一级结构指多肽链中氨基酸的排列 顺序。 一、蛋白质的一级结构 主要的化学键 肽键,有些蛋白质还包括二硫键。 一级结构是蛋白质空间构象和特异生物学 功能的基础。 目 录 目 录 二、蛋白质的二级结构 蛋白质分子中某一段肽链的局部空间 结构,即该段肽链主链骨架原子的相对空 间位置,并不涉及氨基酸残基侧链的构象 。 定义 主要的化学键 : 氢键 目 录 (一)肽单元 参与肽键的 6 个原子 C ? 1 、 C 、 O 、 N 、 H 、 C ? 2 位于同一平 面, C ? 1 和 C ? 2 在平面上所处的 位置为反式 (trans) 构型,此同 一平面上的 6 个原子构成了所谓 的 肽单元 (peptide unit) 。 目 录 蛋白质二级结构的主要形式 ? ? - 螺旋 ( ? -helix ) ? ? - 折叠 ( ? -pleated sheet ) ? ? - 转角 ( ? -turn ) ? 无规卷曲 ( random coil ) (二) ? - 螺旋 目 录 目 录 (三) ? - 折叠 目 录 (四) ? - 转角和无规卷曲 ? - 转角 无规卷曲是用来阐述没有确定规律性的那部 分肽链结构。 目 录 (五)模体 在许多蛋白质分子中,可发现二个或 三个具有二级结构的肽段,在空间上相互 接近,形成一个特殊的空间构象,被称为 模体 (motif) 。 目 录 钙结合蛋白中结 合钙离子的模体 锌指结构 目 录 (六)氨基酸残基的侧链对二级结构形成 的影响 蛋白质二级结构是以一级结构为基础的。 一段肽链其氨基酸残基的侧链适合形成 ? - 螺旋 或β - 折叠,它就会出现相应的二级结构。 目 录 三、蛋白质的三级结构 疏水键、离子键、氢键和 Van der Waals 力等。 主要的化学键 整条肽链中全部氨基酸残基的相对空间位置。 即肽链中所有原子在三维空间的排布位置。 (一) 定义 目 录 目 录 ? 肌红蛋白 (Mb) N 端 C 端 目 录 纤连蛋白分子的结构域 (二)结构域 大分子蛋白质的三级结构常可分割成一个或 数个球状或纤维状的区域,折叠得较为紧密,各 行使其功能,称为结构域 (domain) 。 目 录 (三)分子伴侣 分子伴侣 (chaperon) 通过提供一个保护环境从 而加速蛋白质折叠成天然构象或形成四级结构。 * 分子伴侣可逆地与未折叠肽段的疏水部分结合随 后松开,如此重复进行可防止错误的聚集发生, 使肽链正确折叠。 * 分子伴侣也可与错误聚集的肽段结合,使之解聚 后,再诱导其正确折叠。 * 分子伴侣在蛋白质分子折叠过程中二硫键的正确 形成起了重要的作用。 目 录 亚基之间的结合力主要是疏水作用,其次 是氢键和离子键。 四、蛋白质的四级结构 蛋白质分子中各亚基的空间排布及亚基接 触部位的布局和相互作用,称为 蛋白质的四级 结构 。 有些蛋白质分子含有二条或多条多肽链, 每一条多肽链都有完整的三级结构,称为蛋白 质的 亚基 (subunit) 。 目 录 血 红 蛋 白 的 四 级 结 构 目 录 蛋白质结构与功能的关系 The Relation of Structure and Function of Protein 第 三 节 目 录 (一)一级结构是空间构象的基础 一、蛋白质一级结构与功能的关系 牛核糖核酸酶的 一级结构 二 硫 键 目 录 天然状态, 有催化活性 尿素、 β - 巯基乙醇 去除尿素、 β - 巯基乙醇 非折叠状态,无活性 目 录 (二)一级结构与功能的关系 例:镰刀形红细胞贫血 N-val · his · leu · thr · pro · glu · glu · · · · · C(146) Hb
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