基因突变与dna损伤修复.ppt

13 基因突变与 DNA 损伤修复 要点： 1. 基因突变的相关概念、类型 2. 基因突变的机制 3. 基因突变的修复机制 4. 基因突变的检测 基因突变（ gene mutation ） : 基因的核苷酸顺 序或数目发生改变。仅涉及 DNA 分子中单个碱 基的改变称点突变（ point mutation ） 。涉及 多个碱基的还有缺失、重复和插入。 突变体 (mutant) ：具有突变表型的细胞或个体。 13.1 基因突变的概念、类别及性质 （ 1 ）概念 ① 从突变的表型 : 1 ）形态突变：突变影响生物的形态结构。 2 ）生化突变：突变影响生物的代谢过程，导致 一个特定生化功能的改变或丧失。 3 ）致死突变：突变影响生物个体的生活力。分 为显性致死和隐性致死。 4 ）条件致死突变：在某一些条件下致死，而在 另一些条件下成活的突变。 （ 2 ）突变类型 ② 从对遗传信息的改变 : 1 ）同义突变 : 碱基序列的改变没有引起产物氨基 酸序列的改变 , 与密码子的简并性有关。 2 ）无义突变 : 某个碱基的改变使代表某种氨基酸 的密码子变成了终止密码子，使蛋白质合成提前 终止，因而蛋白质产物一般是没有活性的。 3 ）错义突变 : 碱基序列的改变引起了产物氨基酸序 列的改变。 有些错义突变严重影响蛋白质活性甚至完全无活 性，从而影响了表现型。如果该基因是必须基因， 则称为致死突变。 有些错义突变的产物仍有部分活性，使表型介于 野生型与突变型之间的中间类型，称为渗漏突变。 有些错义突变不影响或基本上不影响蛋白质的活 性，不表现明显的性状变化，称为中性突变。 ③ 按其发生的原因 : 1) 自发突变（ spontaneous mutation ）：在 自然情况下发生的突变。 2) 诱发突变（ induced mutation ）：人们有意 识地利用物理、化学诱变因素引起的突变 。 ①随机性：可发生在体细胞和生殖细胞中。 生殖细胞的突变频率高于体细胞。体细胞突变 在显性或纯合状态才能表现，出现嵌合体。 ②稀有性 ：突变率是很低的。 高等动植物 10 -5 ～ 10 -8 ，细菌 10 -4 ～ 10 -10 ，反应 了物种的基因的相对稳定性。 （ 3 ）突变的性质 ③可逆性 1) 野生型基因 突变型。 2) 回复突变率一般低于正突变率。 3) 真正的回复突变很少发生。常被第二个位点的 突变所抑制，抑制因子突变（ suppressor mutation ）。 4) 回复突变的有无是区别基因突变与染色体缺失 或重复的标志。 正突变 回复突变 ④ 突变的多方向性和复等位基因 同一基因可突变为多个等位基因。突变的基 因可以再突变。这一系列的等位基因就叫做复 等位基因。这是由于同一座位内的不同位点上 的结构发生变化产生的。 ⑤ 突变的有害性和有利性。 一般，有害突变多，有利突变少。 eg. 5-BU 是胸腺嘧啶 (T) 的结构类似物，酮式结 构易与 A 配对；烯醇式结构易与 G 配对。 13.2.1 碱基类似物 13.2 点突变的诱变机制 A.T→A. 5-BU （酮式） → G. 5-BU （烯醇式） → G.C A. 5-BU G.C→A.T 2-AP 是腺嘌呤的类似物，既可与 T 配对，也可 与 C 配对。 A.T→ 2 - AP .T→2 - AP .C→G.C G.C→2 - AP .C→ 2 - AP .T → A.T （ 1 ）烷化剂 : 甲磺酸乙酯 (EMS) 、亚硝基胍 (NG) 等。通过改变碱基结构使碱基错配。当 G 烷基化后 可与 T 配对，导致碱基转换。 G.C→A.T。 或：烷化剂使嘌呤脱落，造成转换、颠换； DNA 链的断裂或交联。 13.2.2 碱基改变 （ 2 ）嵌入剂 eg. 吖啶橙、吖啶黄素、原黄素等碱基对的类 似物，易造成移码突变。 （ 1 ）紫外线： 产生环丁烷嘧啶二聚体和 6-4 光产物。 ①双链间形成，阻碍 DNA 的复制。 ②同一链上相邻 T 间形成，阻碍碱基的正常配对和 腺嘌呤的正常掺入，使复制在这个点上停止或错 误进行，产生碱基顺序改变了的新链。 13.2.3 碱基损伤 （ 2 ）黄曲霉 (B1) 的作用 使鸟嘌呤 G 脱落， SOS 修复引入 A, 造成 G.C → A.T 。 13.2.4 基因的定点突变 1 ）寡核苷酸诱导的基因定点突变 将某基因克隆到载体上→人工合成含有突变位 点的一对引物（突变位点位于引物中心附近，两 端有足够的序列足以互补配对）→ PCR 扩增 →DpnⅠ酶切→将突变 DNA 转入受体→筛选重组 子。 2 ）双引物法 将某基因克隆到载体上→人工合成一对互 补的含有突变碱基的引物 → 在基因的上游和下游 各设计一个引物，分别与突变位置