动物微生物应用技术 病毒及病毒类疾病的实验室诊断 常见的动物病毒.pptVIP

病鸡单侧翅麻痹，下垂 * * 病鸡腿麻痹、瘫痪，呈“劈叉”姿势 * * 病鸡腿麻痹、瘫痪，卧地 * * 虹膜色素（特征）消失，变为灰色，（灰眼，鱼眼、蛤蟆眼），瞳孔边缘不整，视光反应迟钝或失明。 (二)致病性 3、眼型 * * 十、马立克氏病毒（MDV） 此种病型仅在宰后拔毛时发现羽毛囊肿大，形成结节或瘤状物，此种病变常见于躯干、背、大腿生长粗干羽毛部位。皮肤病变以羽毛囊为中心，呈半球状突出于表面，或融合呈丘状。 (二)致病性 4、皮肤型 * * 十、马立克氏病毒（MDV） （三）微生物学诊断 病毒的分离：把患病鸡的组织做适当处理后接种于7日龄SPF（无特定病原）雏鸡的腹腔，每只0.3～0.5ml，接种4～6只，接种后严格隔离，并用已知的特异性免疫血清处理病料做对照鸡试验，接种后2～ 10周观察接种鸡和对照鸡的病理变化，若有典型病变和组织学病变，而对照鸡没有出现，则证明雏鸡发生了MDV感染。 琼脂扩散试验：诊断该病的简易方法是琼脂扩散试验，中间孔加阳性血清，周围插入被检鸡羽毛囊，出现沉淀线为阳性。免疫荧光试验等血清方法可检出病毒。病毒分离可接种4日龄鸡胚卵黄囊或绒毛尿囊膜，再做荧光抗体染色或电镜检测作出诊断。禽白血病病毒往往与本病毒同时存在，要注意鉴别。 * * 十、马立克氏病毒（MDV） （四）防治 由于雏鸡对MDV的易感性高，尤其是1日龄雏鸡易感性最高，所以防治本病的关键在于搞好育雏室的卫生消毒工作，防止早期感染，同时做好1日龄雏鸡的免疫接种工作，加强免疫，发现病鸡立即淘汰。 * * 十、马立克氏病毒（MDV） 十一、猪瘟病毒（HCV） 由猪瘟病毒引起猪的急性、热性、高度接触性的传染病。各种年龄的猪只发病。发病率极高，死亡率很高，有时高达80～100%，对养猪业造成极为严重的危害。 猪瘟已遍及世界各地，被国际兽疫局(OIE)列入A类传染病。 * * 是猪瘟的病原体， 属于黄病毒科/瘟病毒属的成员； 基本呈球形，直径40~50nm； 有囊膜，囊膜上有55和46kD两种糖蛋白； 核衣壳20面体对称； 基因组为单股RNA，约12kbp。 （一）生物学特性 * * 十一、猪瘟病毒（HCV） 抵抗力较强： 60℃ 16~24小时、72~76℃ 1小时，才能致死 对紫外线抵抗力较强； 5%NaOH需1小时，才能灭活； 在pH4.8-5.5时比在中性环境中更稳定； 干燥的空气环境，病毒很快灭活； 对乙醚、氯仿、胰酶等敏感； 5%石炭酸15分钟可灭活。 （二）抵抗力 * * 十一、猪瘟病毒（HCV） 病毒只有1个血清型。猪瘟病毒和牛粘膜腹泻病毒具有共同的糖蛋白抗原，两种病毒在核酸类型、形态和理化特性等方面均较相似，但可用单克隆抗体予以鉴别。 （三）抗原性 * * 十一、猪瘟病毒（HCV） HCV可在猪肾、脾、睾丸、胎皮、骨髓、淋巴结、白细胞等原代细胞中生长。 HCV能增强NDV对猪睾丸细胞的致病效应。HCV和NDV在猪睾丸细胞上均不产生CPE,但在接种HCV后3天再接种NDV，可产生明显的CPE，而且提高了NDV的滴度，根据CPE的有无可间接测定HCV，此试验称为“鸡新城疫病毒强化试验”（END试验）。 （四）培养特性 * * 十一、猪瘟病毒（HCV） 不同品种和年龄的猪对HCV均易感；特别是幼猪。 该病表现为：最急性、急性、慢性。 发病率和死亡率均可高达90%以上。 急性发病的主要特征是由于血管变性而致全身广泛出血、坏死和梗死。 怀孕母猪感染，可引起幼猪的先天性感染。 （五）致病性 * * 十一、猪瘟病毒（HCV） 仔猪扎堆 皮肤出血 * * 皮肤淤血 皮肤坏死结痂 * * 淋巴结出血 * * 雀斑肾 脾脏出血性梗死 * * 猪喉、会厌软骨粘膜出血 * * 回盲口附近粘膜呈纽扣状坏死 * * 繁殖障碍型母猪产弱仔 产的死胎、木乃伊胎 * * 仔猪发生结膜炎 * * （六）微生物学诊断 病料的采集 高热期的血液、淋巴结、脾和扁桃体； 慢性病例可采集流产胎儿和死产猪的脏器。 END试验 荧光抗体试验 酶标抗体技术：组化法和ELISA 兔体反应试验 健康猪接种试验 * * 十一、猪瘟病毒（HCV） 兔体反应试验： 取健康易感兔测定体温后,接种送检病料,每天测定体温,7天后再接种兔化猪瘟弱毒并连续测温3天。如果兔体温没有升高或升高不到1℃，则证明病料中存在HCV。（同时设不接种病料的对照兔,它们在接种兔化弱毒后体温应该升高） 病料 兔 无体温反应 兔化弱毒 兔 病料含HCV 7天 有体温反应 * * 十一、猪瘟病毒（HCV） （七）免疫与治疗 1) 根据具体情况，制定相应的防制措施；主要是采用猪瘟兔化弱毒疫苗和灭活疫苗进行主动免疫。可应用高免血清进行被动免疫和治疗，但价格昂贵，有效期短。 2) 患猪瘟耐过的猪可获得很高的免疫力。 * *