高考生物必考题型早知道专题15基因工程克隆技术(教师版)新人教版.docxVIP

- - PAGE # - 专题十五 基因工程 克隆技术 琴纲要求： :基氐工程的诞生1 ■: 2基区工程的原理及技术II ； ?基医工程的应用E ； -蛋白应工程I? 「植粳的鉅銀培养「； 3动報的细胞培养与萍鈿舱克隆I； :细腿融合与单克隆抗体-II ° 考点突破 考点一基因工程 与基因工程有关的几种酶 名称 作用 参与生物过程 相同点 DNA连接酶 连接两个DNA片段 化学本质均 为蛋白质，合 成场所均为 核糖体 限制性核 酸内切酶 切割某种特定的脱氧核苷酸序列 基因工程 DNA聚合酶 在脱氧核苷酸链上添 单个脱氧核苷酸 DNA复制 RNA聚合酶 在核糖核苷酸链上添加单个核糖 核苷酸 转录 解旋酶 使碱基间氢键断裂，形成脱氧核 苷酸单链 DNA复制及转录 逆转录酶 以RNA为模板合成DNA 逆转录、基因工程 例1、已知在质粒pZHZI中，限制酶 G切割位点距限制酶 E切割位点0. 8kb，限制酶H切割 位点距限制酶F切割位点O. 5kb。若分别用限制酶 G和H酶切两份重组质粒 pZHZ2样 品，据 表4所列酶切结果判断目的基因的大小为 kb;并将目的基因内部的限制酶 G和H切割位点标 注在图19中。 *4 ￡ I J I ■ I ■ L 2 丄丄 L I- L 丨 I III」 ~巫料反礒 U的讯凶 (J H ? , j- ? . . _ _ I ni If n L 2 Icfl 代衣(H kb) 1 I kb 3.3 kh H 19 s H G 11*」』一丄1. L』L丄1 I 1 | ]丄| [ 屈粒也域 口的准囚 答案：见右團 （毎小唏代袁01 UO 解析:根搭題中信息■原来巔粒桧度为厂讥切去E7之闾的还有二比』仙入目的基因后构成重蛆城粒， 重俎廣粒民蔗为可推导出目的基因长虞为：.2kb-重紅质粒中芒的切割位点距E 的切削位点:Skb,单独用限制商a切割后产生：.紙和=：怎的两种片铁 总阴左昴王贯竹中阱亍巴t苛 示出来的E酶识别位点占卜I楚有一平甑识别住点：H的酶切应点距FJ : - ?方m单独酶切产生二止和 二、也两和片段■说明在重蛆虜粒中舎有另外一牛m酌酶切位点.根曙題申信息狸示将目的基因內部删艮 制龜C?和H的识别位点标注在圉：/申S可确定在Ef之间分别合有G和三的一个识别便点-可国淀E 的识別位点，在举例E点右测Mk匕处，H的识别应点在距F左側汀厲处口 薛习亠（匸二上遍「）若想在Lh羊的饥汁中收菽上述目的墓因的表达产切I 11需将重祖质竝二工二忌扎 至山革的 ■占蜩中。若?盘芒进入细聽后冠入在一条染邑怖二」■邙点在保皆基因宛合子山羊的 方式是 - * 苔秦：受清聃 转基因山丰何栩互發配 解析；将目的基因导入动韧细胞中 通常以受蓿舸作尙雯儒细曲』当受桔旳境育咸山羊后.越雌性山羊的 乳汁中町耳提取到目的基因的恚达严物口重殂质粒插入在一探累色萍口、二上■可道过雌雄转基因山羊杂 口的方法壬昔取转基因纯合子山羊? 考点二基因工程的基本操作程序 程序 说明 目的基因 的获取 ①从自然界中已有的物种中分离出来；②用人工的方法合成；③从基 因文库中获得； ④通过PCR技术获得 基因表达载 体的构建 要点：冋种限制酶切割目的基因与质粒； 双酶切；运载体的要求；基因 表达载体的组成 将目的基 因导入受 体细胞 ①受体细胞种类：大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、酵母菌和动植 物细胞；②导入方法：显微注射法、农杆菌转化法、Ca2+处理细胞使细 胞壁的通透性增大等 目的基因 的检测与 鉴定 检测对象：①检测转基因生物的染色体 DNA上是否插入了目的基因； ②检测目的基因是否转录出了 mRNA③检测目的基因是否翻译成了蛋 白质。 检测方法： 分子检测法 ①和②都是核酸分子杂交技术，③是抗原抗体杂交 法；形态检测法一一可根据目标性状的有无来判断目的基因是否表达 例2、图1表示含有目的基因 D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图 2表示 一种质粒的结构和部分碱基序列。现有 Msp I、BamHI、Mbo I、Smal4种限制性核酸内切酶， 它们识别的碱基序列和酶切位点分别为 C「CGG GATCC「GATC CCCGGG请回答下列问题 1価基13口 严 f 4 % I II I I I I I \~\ I |i|J| I I~Pi I I LLLL I*1 ~I I I I I~GGATCC C^CGGG C C CGGG GG ATCC CCTACCr (?CpGCC U GGGCCn CCTACG hj_J——.-I ill.,——L±J_ 514 bp 7 细 hp 4* 6S8 bp | | I (1)图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由连接。 ⑵ 若用限制酶Smal完全切割图1中DNA