畜产品检测技术 气质联用技术 PPT--液相色谱串联质谱法测定激素（盐酸克伦特罗、莱克多巴胺）-确证与定量.pptx

液相色谱串联质谱法测定激素（盐酸克伦特罗、莱克多巴胺）-确证与定量主讲：张伟 筛选 食品营养与检测专业教学资源库 目录页1 检测依据2 液质联用法检测瘦肉精 — 1 — 食品营养与检测专业教学资源库 检测依据1检测标准：GB-T22286-2008 动物源性食品中多种β-受体激动剂残留量的测定 液相色谱串联质谱法该标准为目前检验检疫、第三方检测液质联用测瘦肉精最常用的标准 — 2 — 食品营养与检测专业教学资源库 液质联用法检测瘦肉精22.1原理试样中的残留物经酶解，用高氯酸调节pH值，沉淀蛋白后离心，上清液用异丙醇-乙酸乙酯提取，再用阳离子交换柱净化，液相色谱-串联质谱法测定，内标法定量。 — 3 — 食品营养与检测专业教学资源库 液质联用法检测瘦肉精22.2实验方法与主要步骤2.2.1主要试剂甲醇（液相色谱纯） 乙酸钠 高氯酸 氨水甲醇溶液 标准储备溶液；混合标准储备溶液；同位素内标物:克仑特罗-D9，沙丁胺醇-D3，纯度大于98%等 — 4 — 食品营养与检测专业教学资源库 液质联用法检测瘦肉精22.2实验方法与主要步骤2.2.2主要仪器:高效液相色谱-串联质谱联用仪:配有电喷雾离子源（ESI）、均质器、漩涡混合器离心机氮吹仪、真空过柱装置。 — 4 — 食品营养与检测专业教学资源库 液质联用法检测瘦肉精22.2实验方法与主要步骤2.2.3主要步骤 （1）提取1.称取5g样品（均匀取样）于50ml离心管中，2.用移液枪加加20ml（2mol/L ,PH=5.2 ）乙酸铵 [l— 5— 食品营养与检测专业教学资源库 液质联用法检测瘦肉精22.2实验方法与主要步骤2.2.3主要步骤 （1）提取3.均浆机均浆4.加标准品（1）内标 100 PPB 各加200ml（2）外标 10PPB ug/kg 250ml（3）β菌酶各30ml（假如仅做克伦特罗一项，无需加该酶） [l— 5— 食品营养与检测专业教学资源库 液质联用法检测瘦肉精22.2实验方法与主要步骤2.2.3主要步骤5.振荡均匀，放入37℃水浴 锅震荡16h 放置一夜（备注：样品中有油脂，需要加入正己烷；若无油脂，无需加入正己烷）6.离心 9000r/min 7min 7.上清液过滤（用漏斗、定量滤纸）到另一新管,用乙酸铵冲洗滤纸详细过程参考实训指导书或国标GB-T22286-2008 — 6 — 食品营养与检测专业教学资源库 液质联用法检测瘦肉精22.2实验方法与主要步骤2.2.3主要步骤2. 净化（1）首先活化MCX固相萃取柱 ，具体操作方法为向MCX柱中依次 加入3ml甲醇，3ml水， 3ml 0.1mol/l 盐酸 ，注意需要等甲醇完全过柱后加水，水完全过柱后加盐酸。（2）上样：将离心所得上清液过柱。（3）淋洗 ：先加3ml 0.1mol/L 盐酸，再加3ml水，然后加3ml甲醇水（1:1），注意，淋洗的顺序和活化固相萃取柱时所加试剂的顺序完全相反，也是依次完全过柱。（4）洗脱：用6ml(乙酸乙酯＋甲醇＋氨水)混合液 洗脱（10：9：10）。详细过程参考实训指导书或国标GB-T22286-2008 — 7 — 食品营养与检测专业教学资源库 液质联用法检测瘦肉精22.2实验方法与主要步骤2.2.3主要步骤（5）浓缩--用氮吹仪吹干样液，吹到似干非干干为止；（6）用1ml 0.1 甲酸/水—甲醇定容；（7）超声后放沃悬器沃悬30s-1min；（8）用注射器吸需要样液，经0.22微米滤膜除杂，转入进样瓶3.液相色谱串联质谱测定详细过程参考实训指导书或国标GB-T22286-2008 — 8 — 食品营养与检测专业教学资源库 液质联用法检测瘦肉精22.2实验方法与主要步骤2.2.4结果计算 计算结果小于本标准检出限0.5ug/kg时，视为未检出 — 9 — 食品营养与检测专业教学资源库 液质联用法检测瘦肉精2备注在检测实验室，确证和定量瘦肉精时，相对于气质联用，更多使用液质联用。 — 10 — 谢谢