（完整版）小议金标法与滴度法的应用及效果观察.docx

关注我 实时更新 最新资料 小议金标法与滴度法 的应用及效果观察 【摘要】目 的探讨金标法以及TRUST滴度法检测梅毒螺旋体 的效果。方法采用酶联免疫吸附试验,甲苯胺红滴度法(TRUST)对147例临床样本进行初级筛选试验，并对初筛结果阳性 的49例血清进行金标法梅以及毒螺旋体检验。结果酶联免疫吸附试验滴度法(TRUST)试验阳性 的49例样本中，金标法阳性46例，二者 的符合率为93.88%。结论金标法与(TRUST)滴度法其灵敏度、特异性无显著性差异(Pgt;0.05),可以联合应用于临床中梅毒 的检测，提高检出率。【关键词】梅毒;抗体;金标法;滴度法大量 的临床资料以及有关 的流行病学调查结果显示，在我国梅毒 的发病率有逐年上升 的趋势[1～2]。因此，开发出一种简便 的、快速 的同时具有较高灵敏度及特异性 的检查方法，对于该种疾病 的预防、治疗以及筛查大量 的献血者无疑具有十分重要 的意义。对筛查者进行血清学检测是诊断梅毒 的重要依据之一，在梅毒 的诊断、治疗以及研究上具有非常重要 的意义。因此，本院将金标法，TRUST滴度法分别应用于对梅毒 的检测，由于TPPA是公认 的比较好 的梅毒抗体 的确认方法，因此分别对样本进行检测，在以TPPA结果进行对比，观察其结果 的一致性，现将分析报道如下。1资料与方法1.1一般资料本组标本选择作者单位2006年4月以来143例，先对临床样本进行初级筛选试验，再对初筛结果呈阳性 的49例血清，进行金标法以及梅毒螺旋体检验。其中男性26例，女性23例，年龄18～78岁，平均年龄(48±26.5)岁。1.2检测试剂甲苯胺红TRUST试剂(上海荣盛生物工程有限公司。批;金标法试剂(上海科华生物。批号：200110225);TPPA试剂(上海实业科华生物技术有限公司。批号：200110201)1.3方法梅毒螺旋抗体检测：采集上述 的试剂盒中所要求 的血清(浆)样本，并且按照试剂盒 的说明分别进行检测。1.4统计学方法采用SPSS15.0统计学软件进行统计学分析。配对计数资料采用χ2检验，Plt;0.05为差异有统计学意义。2结果根据相关文献，TPPA是公认 的较好 的梅毒抗体确认方法，以其结果为标准。其中，采用金标法试剂 的假阳性率为4.00%(2/50)，假阴性率为12.40%(12/97);TRUST滴度法试剂 的假阳性率为6.25%(3/48)，假阴性率为35.05%(34/99)。TRUST滴度法和金标法之间在假阳性之间无明显 的区别(χ2值分别为0.43，0.41，Pgt;0.05)，TRUST滴度法 的假阴性率明显高于金标法(7.08，6.97，Plt;0.01)。表1金标法和TRUST滴度法阳性例数比较3讨论梅毒螺旋体检测,以此明确患者受血前或术前 的情况,是如今医 学发展 的必经步骤，是新 的《医 疗事故处理条例》实行举证责任倒置 的参照。在传染性指标 的检测中，选择初筛试验时，试验 的灵敏度很重要，敏感性差 的，易出现漏检，不适合筛选献血者及输血前患者各传染性指标 的检测。梅毒螺旋体侵入机体后产生两种抗体：为心磷脂抗体及抗密螺旋体抗体，检测前者 的方法，目前，在国内最为常用 的是RPR和TRUST滴度法，且长期以来成为筛查检测献血者 的主要方法。机体感染梅毒螺旋体后，产生特异性抗螺旋体抗体(TPAb)及非特异性 的抗类脂质抗体。梅毒特异性抗体出现早、消失慢，即使经正规 的抗梅毒治疗，仍然检出了特异性抗体，甚至可终生检出[3]。据文献[4]报道，人体感染梅毒螺旋体后，血清中产生 的抗螺旋体抗体相对与抗类脂质抗体早[5]。胶体金免疫层析法即金标法，是近几年发展起来 的继三大标志免疫检测之后一种新 的免疫检测技术[6]。该试验 的原理是将各种试剂逐一固定在同一张试纸条上，检测标本列于试纸条 的一端，一种试剂溶解后，通过毛细血管作用移动，与条上另外 的试剂接触发生反应，像层析一样[7]。TPPA检测血清中 的梅毒螺旋体抗体，特异性好、灵敏度高，已是目前公认 的检测梅毒血清试验方法;但因试剂较贵，检测用时较长。金标法，采用了纯化重组基因 的梅毒抗原，胶体金作为其指示标记，硝酸纤维素膜上进行反应，双抗原夹心法原理为基础，快速定性 的检测人血清(血浆)中 的梅毒螺旋体特异性抗体，其特异性、灵敏度与TPPA相近，符合率为93.88%(46/49)，从而替代TPPA作为快速梅毒血清确证试验。但是血清(血浆)中特异性梅毒螺旋体抗体浓度过低时，梅毒螺旋体抗体胶体金法会产生假阴性反应，这就需要与TPPA方法结合，再进行综合 的判断。本实验结果显示，金标法其特异性和TPPA相比无显著差异，且明显好于TRUST法。TRUST滴度法和金标法之间在