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分子诊断发展简史：一场由 “螺旋双杰”引发的发明 分子诊断发展四阶段 第一阶段： 利用分子杂交技术进行遗传病基因诊断 ：通过婴儿胚胎期进行产前诊断，超 早期预知某些疾病发生、发展和预后。 1978 年著名没计划以科学家简悦威等应用液相 DNA 分子杂交成功进行了镰形细胞贫血症的基因诊断。 第二阶段： 以 PCR 为基础的分子诊断： PMullis 发明 PCR 技术后迅速发展，标志着传统 基因诊断发展到更全面的分子诊断技术。 第三阶段： 以生物芯片技术为代表的高通量检测技术 ：1992 年美国 Affymetrix 制作出第 一章基因芯片， 标志着分子诊断进入生物芯片技术阶段。 生物芯片技术解决了传统核酸印迹 杂交技术复杂、自动化程度低、检测目的分子数量少、低通量的问题。 第四阶段： 以 NIPT 为代表的第二代测序技术 ：Ronaghi 分别于 1996 年与 1998 年提出了 在固相与液相载体中通过边合成边测序的方法 -焦磷酸测序。目前常见的高通量第二代测序 平台主要有 Roche454、 IlluminaSolexa 、ABISOLiD 和 LifeIon Torrent 等，其均为通过 DNA 片段化构建 DNA 文库、文库与载体交联进行扩增、在载体面上进行边合成边测序反应，使 得第 1 代测序中最高基于 96 孔板的平行通量扩大 至载体上百万级的平行反应，完成对海量 数据的高通量检测。 1 代、 2 代测序区别 分子诊断三座丰碑 1953 年， 沃森和克里克 发现了 DNA 双螺旋的结 构， 开启了分子生物学时代， 使遗传的 研究深入到分子层次， “生命之谜 ”被打开，人们清楚地了解遗传信息的构成和传递的途径。 在以后的近 50 年里，分子遗传学、分子免疫学、细胞生物学等新学科如雨后春笋般出现， 一个又一个生命的奥秘从分子角度得到了更清晰的阐明。 DNA 双螺旋结构的出现时分子生 物学行程的重要标志，对人们认识蛋白质合成、 DNA 复制和突变具有重要意义，为分子诊 断的蓬勃发展奠定基础。 “DNA之父 ”Watson、Crick 50 年前， 科学界的 “八大恶棍 ”之一凯利 ?穆利斯还只是美国某制药公司的小职员， 整天做 着把先天致病基因给剔除掉的白日梦， 然而先要复制 DNA ，才有足够的时间慢慢修复。 1966 年，穆利斯尝试磕了一次药，并从此不可自拔。后来，迷幻剂被列为违禁药品，于是穆利斯 自己调配迷幻剂的替代品。在制作迷幻剂时，他居然想到了复制 DNA 的办法 —— 聚合酶链 式反应（ PCR），并最终凭他跟迷幻剂的结晶 PCR 获得了诺贝尔奖。从此开启了分子诊断 的 PCR 时代，标志着传统的基因诊断发展到更全面的分子诊断。 “PCR之父 ” Kary Mullis “只是个在实验室里乱搞的家伙 ”弗雷德里克 ·桑格开拓人类基因研究，被尊为 “基因学之 父 ”，他与同事合作研发的快速为 DNA 定序，成为绘制人类基因组图谱的先驱。桑格完整 定序了胰岛素的氨基酸序列，证明蛋白质具有明确构造；他上世纪 70 年代提出快速测定脱 氧核糖核酸（ DNA ）序列的技术 “双去氧终止法 ”,即双脱氧核苷酸链中止法，又称 “桑格法 ”。 “双去氧终止法 ”测序法拉开了 DNA 测序的序幕，解开了人体