2019年最新-急性有机磷中毒动物机能指标的动态观察与测定-文档资料-精选文档.ppt

急性有机磷中毒 动物机能指标 的 动态观察 与测定 指导老师：林明栋 余剑平 组员：陈春宇 陈达标 黄利军 李庆志 一 课题背景知识回顾 ? 近年来，急性有机磷农药中毒（ AOPP ）患者逐 年增多，对 AOPP 的防治成了国内外研究的一个 热点课题。 有机磷酸酯类进入机体后，与血浆胆碱酯酶 （ AChE ）生成难以水解的磷酰化胆碱酯酶，使 AChE 失去水解 ACh 的能力，导致不同程度的中 毒表现。 ? 一 课题背景知识回顾 ? 有机磷中毒时对 AChE 的抑制作用已阐明， 但中毒过程中逐步出现的 M 样， M N 样和中 枢神经系统（ CNS ）的轻、中、重度中毒 表现。通常只是以测定的 AChE 值为判定 AOPP 的中毒程度及指导抢救用药的常规方 法。目前临床上的传统抢救方法是抗胆碱 药阿托品和胆碱酯酶复能剂氯磷定配伍。 一 课题背景知识回顾 临床上在急性有机磷中毒抢救方面工作都 比较单一地依赖于血浆 ChE 值作为诊断依据， 且在抢救过程中对该项指标进行动态监测 也鲜见报道。 ? 探索急性有机磷中毒及给予药物解救后多 个指标的动态变化进行监测记录，能够帮 助我们进一步了解中毒及解救药物作用机 理，指导临床治疗。 ? 二 探索性研究成果阶段性汇报 （一）实验方案 ① 材料及方法 （一）试剂 ? 0.1% 硫酸阿托品、 5% 敌百虫、 1% 肝素、 2.5% 解磷定、 75% 酒精、胆碱酯酶试剂盒 （南京建成生物研究所）、血糖试纸 ① 材料及方法 （二）仪器 ? 血糖仪（ Sure Step ）、恒温水浴、分光光 度计、离心机、微量移液管（ 50- 200μL 、 200- 1000μL ）、试管架、一次性小试管若 干（ 10ml ）、兔固定箱、注射器（ 5ml 、 10ml ）、量筒（ 100ml ）、烧杯（ 150ml ）、 玻璃棒、保温瓶、试剂瓶、测瞳尺（可用 游标卡尺代替）、刀片、棉球 ① 材料及方法 （三）实验动物及分组 ? 实验动物：家兔，体重 2~2.5kg ? 动物分组：分阿托品急救组和解磷定急救 组，每组 4 个动物 ① 材料及方法 （四）动物模型建立 ? 预实验： ? a. 取家兔 2 只，编号，称重。观察呼吸等各项指标； ? b. 将其中一个兔固定于兔箱内，以醮有酒精的棉球擦拭 兔耳缘静脉，使血管扩张，充血明显时，用刀片横断耳缘 静脉，取一小滴滴到血糖试纸上测定正常情况下血糖，然 后让血液自然滴入试管（管中预先滴入 2 滴肝素，自然干 燥后备用）中，供测正常胆碱酯酶活性用（测定胆碱酯酶 活性备用血取出来后马上放进冰水中冷冻，保持酶活性， 待整个实验全部血样取完后统一测定酶活性）。 ? ? ? ? c. 按照 2.0ml/kg 的标准从耳缘静脉处注射 5% 敌百虫，观 察记录表所示各项指标，中毒症状明显时按照 b 步骤中的 方法取血测定血糖和备血测定胆碱酯酶； d. 出现重度中毒现象时，立即给家兔注射 0.1% 硫酸阿托 品 1ml/kg 、当症状出现明显缓解时取血测定血糖、备血测 定胆碱酯酶活性； e. 换用另外一只家兔，按照同样的方法步骤（ d 步骤注 射 2.5% 解磷定）进行预实验。 f. 测定胆碱酯酶活性（步骤参考试剂盒使用说明书）； 通过预实验过程主要摸索清楚出现中毒的 大概时间、中毒的症状，以便适当地确定 取血测定点，并熟悉操作； ? g. 按照前面的步骤和预实验摸索出来的取 血点，分成阿托品急救组和解磷定急救组 （每组 4 个家兔，雌雄各半）进行正式实验。 （二）实验结果 中毒及解救体征变化趋势 给敌百虫后 家兔呼吸变得急促，瞳孔变小，唾液分泌 增多，排便增多。几分钟后，家兔四肢开 始瘫软，行动不便并出现肌颤。随着中毒 时间延长，以上观察指标变化更为明显。 瞳孔继续变小，并有发散现象；唾液大量 增多，部分家兔泪腺分泌增多；排便频繁 且逐渐呈稀糊状；呼吸更为急促，部分家 兔可闻及湿罗音。肌颤明显加剧，四肢瘫 软。其精神状况逐渐变差，目光涣散，最 后意识模糊，甚至完全丧失。 ? 阿托品解救 瞳孔迅速变大；唾液和泪腺分泌较前明显减少， 排便减少，呈稀糊状；以上指标逐渐恢复到正常 水平。其呼吸急促，可闻及明显湿罗音。肌颤较 前减缓，但没有消失，四肢仍然完全瘫软无力， 不能站立；精神状况逐渐恢复，意识清醒。 ? 解磷定解救 呼吸