试验二血涂片与染色.ppt

实验 二 血液标本采集 血涂片制备 ? 【目的】 掌握血涂片的制备和染色。 ? 【原理】 把血液制成细胞分布均匀的薄膜涂片， 用瑞吉氏染液染色。不同的细胞种类及细胞的 不同成分，对酸性及碱性染料的结合能力不同， 而使各种细胞呈现出各自的染色特点。 ? 【器材】 载玻片、推片、微量吸管、乳胶吸头。 ? 【标本】 EDTA 抗凝静脉血。 染色 ? 【试剂】 ? 1 ．瑞吉式染液 ? (1)I 液 : 包含瑞氏染料 1.0g 、吉式燃料 0.5g 、纯甲醇 600ml 、甘油 15ml 。 ? (2) Ⅱ液 : 磷酸盐缓冲液 (pH6.4 ～ 6.8) ，含磷酸二氢 钾 0.3g 、磷酸氢二钠 0.2g 、蒸馏水加至 1 000ml 。 【 操作 】 ? (1) 采血 ? (2) 推片，推片与载片夹角 30-45 度平稳地向前 移动，血膜应呈舌状，头、体、尾三部分，且 清晰可见。 ? (3) 干燥 : 晃动。 37 ℃温箱中促干。 ? (4) 染色 : 将玻片平置于染色架上，滴加 ( Ⅰ 液 )3 ～ 5 滴， 约 0.5 ～ lmin 后，滴加等量缓冲液 ( Ⅱ液 ) ，摇动玻片混匀。 ? (5) 冲洗 : 5-10min 后用流水冲去染液，待干。 ? (6) 观察结果 : 将干燥后的血涂片置显微镜下观察。用低 倍镜观察血涂片体、尾交界处的血细胞。 一张良好血涂片的要求： ?